发酵知识方案研究.pptx

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发酵知识方案研究.pptx

发酵知识;发酵的应用;工业上常用的微生物;发酵工程: 是指采用工程技术手段,利用生物(主要是微生物)和有活性的离体酶的某些功能,为人类生产有用的生物产品,或直接用微生物参与控制某些工业生产过程的一种技术。 注:现在广义的发酵工程已包括了动物和植物细胞工程技术;上游工程:包括优良菌株的选育(筛选、分离、改造、纯化、鉴定),实验室阶段的条件优化(如培养基配比、培养T、pH等),菌种保藏、复壮。 中游工程:也是狭义的发酵,指最适发酵条件下,在发酵罐中大量培养细胞和生产代谢产物的工艺技术:包括对原料和设施的灭菌技术(方法、时间、温度)、空气过滤技术(材质、孔径)、计算机控制技术(参数检测、电磁阀开关控制、生产过程中相关数据的记录等)、工艺放大技术(培养基成分替代变更、接种时间及数量的调整、诱导物添加数量及诱导时间的确定等)。 下游工程:指从发酵液中分离和纯化产品的技术:包括固液分离技术(离心分离,过滤分离,沉淀分离等工艺),细胞破壁技术(超声、高压剪切、渗透压、表面活性剂和溶壁酶等),蛋白质纯化技术(沉淀法、色谱分离法和超滤法等),产品的包装处理技术(真空干燥和冰冻干事燥等),和废物(废水、废气、废渣)处理技术。 ;;工 业 发 酵 分 类;影响发酵过程的因素 菌种 无菌操作 培养基 设备 过程控制;设备 分为主体生产设备(发酵罐)和辅助设备;发酵罐的基本条件;发酵罐的种类;四种好氧发酵罐比较;机械搅拌通风发酵罐;机械搅拌通风式:直接通无菌空气 自吸式:利用搅拌旋转时产生的抽吸力吸入空气。它的搅拌器是一个空心叶轮,叶轮快速旋转时液体由于离心作用而被甩出,并在叶轮空心部分形成负压,从而将罐外的空气吸到罐内。 气升式:借助在环流管底部的喷嘴将空气以250-300/s的高速喷入环流管,使气泡分散在培养基中。由于环流管内部的液体溶有大量气泡,其密度明显小于反应器主体中培养液的密度。 塔式:利用通入培养液的无菌空气泡上升来带动液体运动,产生混合效果的非机械搅拌式发酵罐。 ;机械搅拌通风发酵罐; 搅拌部分: 是由安装在一根轴上的多个涡轮式搅拌浆组成的。它具备许多功能:使罐内物料混合良好,便于营养吸收;可打碎气泡,加强氧的传递效果;与挡板结合,消除中心漩涡;产生高剪切速度,有利于物料混合均匀。 注:挡板和罐壁之间应有一定的空隙,以免出现死角并积垢。 进出料口:是进料和出料的装置,同时还配有补料口装置。 测量系统:包括温度、酸度和溶解氧的数据监控、传感器和测量装置;发酵工艺流程 准备——消毒灭菌——接种培养——补料——放罐与清洗——检查与维护;1.3 试运转 打开接种口盖,向罐内注入水,盖上并旋紧接种口盖;夹套中通入冷却水,充满水后关闭冷却开关;罐体中通入空气,使罐压保持在0.12MPa;逐一检查水泵、加热器、搅拌电机、蠕动泵、电磁阀、照明灯等是否正常;校验pH和溶氧电极,设置温度、转速、pH、补料、消泡等参数,观察每个参数的测量与控制是否正确;排放罐内液体,排放罐内气体,关闭循环水泵。 注:开搅拌时应使罐内装有不少于1/3全容积的液体,以免搅拌浆因空载引起晃动,造成搅拌轴变形甚至引发意外。 ;3 接种培养;4 补料;5 放罐与清洗 放罐:发酵完毕,将发酵液从底阀和取样放料阀放出,按工艺要求另行处理。 清洗:发酵罐清洗须严格按照设备清洗SOP进行,清洗前小心取下pH电极和溶氧电极,将pH电极浸入3mol/L的KCl溶液中,溶氧电极浸入蒸馏水中。 6 检查与维护 检查:清洗完毕,一定要检查各阀门及计算机控制系统是否如要求开关,各接口是否有泄漏等。 维护:若发现问题,须及时处理,并做好相应记录。;发酵过程控制;温度对发酵生产的影响;发酵过程引起温度变化的因素 发酵热 发酵过程中所产生的热量,叫做发酵热。 Q发酵=Q生物+Q搅拌-Q蒸发-Q辐射 生物热 来源 :微生物对营养物质的分解所释放的能量 影响因素: 菌株 培养基成分 发酵时期 ;pH对生长的影响机制 对E合成的影响 对E活性的影响 对ATP生产率影响: 影响菌体细胞膜电荷状况,引起膜的渗透性的变化,因而影响菌体对营养物质的吸收和代谢产物的分泌。 影响培养基某些重要营养物质和中间代谢产物的离解,从而影响微生物对这些物质的利用 pH对产物合成的影响 产物合成阶段的最适pH值和微生物生长阶段的最适pH往往不一定相同,这不仅与菌种特性有关,还取决于产物的化学特性。 pH影响代谢方向:pH不同,往往引起菌体代谢过程不同,使代谢产物的质量和比例发生改变。 ;引起发酵液中pH变化的因素;调节PH方法;溶解氧控制的工艺方法;补料对发酵生产的影响;泡沫对发酵生产的影响;影响因素 通气搅拌的强度

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