静态生物化学复习汇编.ppt

帽子结构 mRNA核内向胞质的转位 mRNA的稳定性维系 翻译起始的调控 帽子结构和多聚A尾的功能 mRNA的功能：作为蛋白质合成的模板。 * tRNA的一级结构特点 含稀有碱基较多 3′末端为 — CCA-OH 5′末端大多数为G 由70~90个核苷酸组成 转运RNA的结构与功能 * tRNA的二级结构 ——三叶草形 氨基酸臂 额外环 * tRNA的三级结构 —— 倒L形 * tRNA的功能 活化、搬运氨基酸到核糖体，参与蛋白质的翻译。 * rRNA的结构 核蛋白体RNA的结构与功能 * rRNA的功能 参与组成核蛋白体，作为蛋白质生物合成的场所。 核糖体的组成 原核生物 真核生物 小亚基 30S 40S rRNA 16S 18S 蛋白质 21种 33种 大亚基 50S 60S rRNA 23S 5S 28S 5.8S 5S 蛋白质 33种 49种 核糖体 70S 80S 核酸的一般理化性质 核酸为多元酸，具有较强的酸性；游离态的核酸等电点较低，一般与金属离子结合存在，提高其溶解度；pH4~11之间，核酸较为稳定； 核酸（DNA和RNA）都是极性分子，都溶于水，而不溶于有机试剂； DNA是高分子物质，粘度极大； 在260nm波长有最大吸收峰，是由碱基的共轭双键决定的。这一特性常用作核酸的定性、定量分析。 1. DNA或RNA的定量 OD260=1.0相当于 50 ?g/ml双链DNA 40 ?g/ml单链DNA（或RNA） 20 ?g/ml寡核苷酸 2.判断核酸样品的纯度 DNA纯品: OD260/OD280 = 1.8 RNA纯品: OD260/OD280 = 2.0 OD260的应用 DNA的变性(denaturation) 定义：在某些理化因素作用下，DNA双链解开成两条单链的过程。 变性因素：过量酸，碱，加热等。 例如：慢慢地升高DNA溶液的温度，随着温度的升高，碱基对之间的氢键被破坏，越来越多的碱基对被拆开，当DNA的溶液被加热到一定温度以上时，双链DNA结构被破坏，最后双链完全分开，形成两个单链。 DNA变性的本质是双链间氢键的断裂 注意与DNA降解区分 变性后理化性质的主要改变： OD260增高 粘度下降 核酸复性时，紫外吸收降低，由于核酸复性而引起紫外吸收降低的现象，称为减色效应。 由于核酸变性而引起紫外吸收增加的现象，称之增色效应。 DNA的紫外吸收光谱 增色效应：DNA变性时其溶液OD260增高的现象。 解链曲线：在连续加热DNA的过程中以温度对A260值作图，所得的曲线称为解链曲线。由双螺旋到变性状态之间的陡变区反映了双螺旋DNA中堆积的、形成氢键的碱基对的破坏程度。 Tm：紫外光吸收值达到最大值的50%时的温度称为DNA的解链温度，又称融解温度(melting temperature, Tm)。其大小与G+C含量成正比。 DNA的复性与分子杂交 DNA复性(renaturation)的定义 在适当条件下，变性DNA的两条互补链可恢复天然的双螺旋构象，这一现象称为复性。 减色效应 DNA复性时，其溶液OD260降低。 热变性的DNA经缓慢冷却后即可复性，这一过程称为退火(annealing) 。 酶 化 学 酶的分子结构与功能 酶促反应的特点与机理 酶促反应动力学 酶活性的调节 酶的不同形式 单体酶(monomeric enzyme) 寡聚酶(oligomeric enzyme) 多酶体系(multienzyme system) 多功能酶(multifunctional enzyme)或串联酶(tandem enzyme) 酶的分子组成 结合酶 (conjugated enzyme) 单纯酶 (simple enzyme) 酶蛋白 (apoenzyme) 辅助因子(cofactor) 全酶 (holoenzyme) 决定反应的特异性 决定反应的种类与性质 金属酶(metalloenzyme) 金属离子与酶结合紧密，提取过程中不易丢失。 金属激活酶(metal-activated enzyme) 金属离子为酶的活性所必需，但与酶的结合不甚紧密。 辅助因子(cofactor) 金属离子 蛋白质辅酶 小分子有机化合物 金属离子的作用 参与催化反应，传递电子（细胞色素中Fe3+ Cu2+）； 在酶与底物间起桥梁作用（激酶中Mg2+与ATP结合 ）； 稳定酶的构象（羧肽酶 Zn2+）； 中和阴离子，降低反应中的静电斥力等。 小分子有机化合物的作用（B族维生素） 参与酶的催化过程，在反应中传递电子、质子或一些基团。 蛋白质辅酶（protein coenzy