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第五章 动物细胞制药 概述； 动物细胞的形态和生理特性； 生产用动物细胞的要求和获得 ； 动物细胞的大规模生产流程； 动物细胞的生产特征 （培养条件和培养基）； 动物细胞培养技术（培养方法和操作技术） ； 动物细胞产品的纯化方法和质量要求（自学） ； 动物细胞生产举例； 课本上的其他内容：动物细胞培养过程的检测与工艺控制（自学） ； 动物细胞生物反应器（自学） ；动物细胞制药的前景与展望（自学） 。 第一节 概述 细胞学说； 细胞培养的概念； 细胞工程的概念； 动物细胞培养的应用； 动物细胞与其他细胞的差别。 细胞学说 提出人：1838年德国的植物学家Schleiden和1839年动物学家Schwann； 内容：细胞是一切动、植物体的基本结构单位； 意义：19世纪自然科学的三大发现之一（恩格斯）。 细胞培养的概念 组织培养或细胞培养：将组织或细胞从机体取出。在体外模拟机体体内的生理条件下进行培养，使之生存和生长；（课本） 动物细胞培养：体外培养，即在无菌条件下，从机体中取出组织或细胞，或利用已经建立的动物细胞系，模拟机体正常生理状态下生存的基本条件，让细胞在培养容器中生存、生长和繁殖的方法。 组织培养：动物组织在体外条件下的保存或生长，此时可能有组织分化，并保持组织的结构和功能。 细胞工程的概念 细胞工程是以细胞为单位，按人们的意志，应用细胞生物学、分子生物学等理论和技术，有目的地进行精心设计，精心操作。使细胞的某些遗传特性发生改变，从而达到改良或产生新品种的目的，以及使细胞增加或重新获得产生某种特定产物的能力，从而在离体条件下进行大量培养、增殖，并提取出对人类有用的产品。 动物细胞培养的应用 作为宿主细胞用于制药：疫苗； 作为反应器用于制药：EPO红细胞生成素； 杂交瘤细胞：单克隆抗体，诊断、治疗； 组织再生与器官移植（个体克隆）； 本身作为产品：皮肤移植，干细胞治疗； 药学研究应用：分子与细胞药理、毒理、代谢； 生命科学研究：器官发生，细胞、分子、遗传学。 动物细胞、植物细胞和微生物细胞的一些重要差别 第二节 动物细胞的形态和生理特性 动物细胞的形态； 细胞生长和基质依赖性； 动物细胞的化学组成和代谢（自学）； 动物细胞的生理特点。 一 动物细胞的形态 动物细胞的结构较原核细胞复杂得多，各种细胞都有明确的分工； 为了适应功能的需要，细胞形态有变化，肌肉细胞、神经细胞、红细胞； 细胞离体培养时，分化的形态经常发生变化，通常按是否贴壁培养分类。 形态特征： 细胞膜； 细胞质； 细胞核； 没有细胞壁； 亚细胞器。 二 细胞生长和基质依赖性 接触抑制（ contact inhibition）： 细胞在生长基质上分裂增殖，逐渐汇成片，当每个细胞与其周围的细胞互相接触时，细胞就停止增殖 特点：保持充足的营养，细胞仍可存活一段时间，但细胞密度不再增加； 大多数细胞有； 少数悬浮培养细胞无。 按基质依赖性细胞的分类 贴壁依赖性细胞（anchoraged-dependent cell）；如：成纤维细胞、心肌细胞 非贴壁依赖性细胞（anchoraged-independent cell）或悬浮细胞；如：淋巴细胞 兼性贴壁依赖性细胞。如：中国仓鼠卵巢细胞 贴壁依赖性细胞（anchoraged-dependent cell） 概念：需要有适量带电荷的固体或半固体支持表面才能生长的细胞； 细胞依靠自身分泌的或培养基中提供的贴附因子才能在该表面上生长、增殖； 当细胞在该表面生长后，一般形成两种形态，即成纤维样细胞型或上皮样细胞型； 大多数动物细胞都属于此类。 非贴壁依赖性细胞或悬浮细胞 不依赖于固体支持物表面生长的细胞，可在培养液中悬浮生长，被称为悬浮细胞； 举例：血液、淋巴细胞、肿瘤细胞和某些转化细胞，Namalwa细胞。 兼性贴壁依赖性细胞 对支持物的依赖性不严格，既可贴壁生长，也可悬浮生长； 举例：CHO中国仓鼠卵巢细胞、BHK细胞； 理想的药物生产细胞系。 三 动物细胞的生理特点 分裂周期长（一般12－48h，不同种属，不同部位可能时间不同）； 生长一般需贴附于基质，并有接触抑制现象； 正常二倍体细胞的生长寿命是有限的（30代，50代，与细胞种族和年龄有关）； 动物细胞对周围环境十分敏感； 动物细胞对培养基的要求高； 蛋白质的合成途径和修饰功能与细菌不同。 动物细胞蛋白质合成场所 游离核糖体：合成的蛋白质用于细胞质基质内； 粗糙内质网上的核糖体：合成的蛋白质是分泌性的和膜中整合的蛋白质，它们多数为糖蛋白。这些寡糖链，有的在内质网中加接（N－链寡糖），有的在高尔基体内加接（O－链寡糖）； 蛋白质的糖基化作用：与细胞的许多生理功能密切相关，如细胞识别、表面受体、胞内消化和外排