第14章讲基因重组和基因工程药事情.ppt

基因重组和基因工程 Genetic Recombination and Genetic Engineering;第一节自然界DNA重组和基因转移是经常发生的 DNA Recombination and Gene Transfer Occur Frequently in Nature;第二节 重组DNA技术又称DNA克隆或分子克隆 ;相关概念 DNA克隆 工具酶 目的基因 基因载体 基本原理 重组DNA技术与医学的关系;一、重组DNA技术相关概念;技术水平：分子克隆(molecular clone) （即DNA 克隆） 细胞克隆 个体克隆（动物或植物）　;应用酶学的方法，在体外将各种来源的遗传物质（同源的或异源的、原核的或真核的、天然的或人工的DNA）与载体DNA接合成一具有自我复制能力的DNA分子——复制子(replicon)，继而通过转化或转染宿主细胞，筛选出含有目的基因的转化子细胞，再进行扩增提取获得大量同一DNA分子，也称基因克隆或重组DNA (recombinant DNA) 。 ; 目的： ① 分离获得某一感兴趣的基因或DNA ② 获得感兴趣基因的表达产物（蛋白质）;限制性核酸内切酶(restriction endonuclease) ;与甲基化酶共同构成细菌的限制修饰系统，限制外源DNA，保护自身DNA。;第一个字母取自产生该酶的细菌属名，用大写； 第二、第三个字母是该细菌的种名，用小写； 第四个字母代表株； 用罗马数字表示发现的先后次序。;（三）目的基因(target gene) ;（四）基因载体;质粒 (plasmid);;二、重组DNA技术基本原理; 以 质 粒 为 载 体 的 DNA 克 隆 过 程;（一）目的基因的获取;目的基因;受体菌条件： 安全宿主菌 限制酶和重组酶缺陷 处于感受态(competent) ;抗药性标记选择，免疫化学方法等。;(插入失活法) 抗药性标记选择;重组DNA技术操作过程可形象归纳为： ;重组DNA技术操作的主要步骤;表达体系的建立： 表达载体的构建 受体细胞的建立 表达产物的分离纯化;第三节 重组DNA技术与医学 的关系非常密切并前景远大;一、疾病基因的发现与克隆;基因工程胰岛素;基因诊断(genetic diagnosis)是利用分子生物学及分子遗传的技术和原理，在DNA水平分析、鉴定遗传疾病所涉及基因的置换、缺失或插入等突变。又称DNA诊断 。;（二）基因治疗的概念;1. 产前诊断 2. 携带者测试 3. 症候前诊断 4. 遗传病易感性;细菌染色体;转基因动植物; 转基因生物的生产;Carolina cotton producers have reduced pesticidesprays and lowered production costs by utilizing genetically engineered cotton varieties ;;基因工程培育抗虫棉的简要过程：;;小结