天净沙系列一步法质粒dnaone-stepplasmiddna-天恩泽.pdfVIP

天 CAT#:70903-50 净 常温运输及保存 沙 系 列 一步法质粒DNAOUT One-StepPlasmidDNAOUT 使用手册V3.5 北京天恩泽基因科技有限公司 北京市海淀区上地信息路26号北京市留学人员海淀创业园中关村创业大厦506 网址：；电话：400-6765278；电邮：order@ 产品及特点 基于碱变性原理的质粒小量制备(Miniprep)是分子克隆研究中最常用的方法之一， 其操作包括三种溶液处理，一般需要30分钟左右的时间才能得到可以上柱的质粒 DNA初提液。本产品采用天泽基因自主开发的一步式细菌裂解技术，只需要一种溶液 处理即可以完成细菌裂解，并且裂解物可以直接上柱纯化质粒DNA，比碱变性法快捷。 本产品的主要特点是: 1. 一步式裂解细菌，比传统的碱变性方法更快捷20分钟以上。 2. 产量跟经典碱变性法相当，产率一般为3-5ug 质粒DNA/mL饱和菌液 （对高 拷贝质粒而言）。 3. 所得质粒DNA呈超螺旋结构的比例比碱变性法更高。 4. 基因组DNA污染少。但由于操作太快，溶液中的RNase来不及降解RNA，一 般会有少量RNA污染。 5. 可以直接用于电泳、酶切、PCR、细菌转化、分子克隆、测序等实验。 规格及成分 成份 编号 大纸盒包装 溶液A 70903a 35mL 离心吸附柱 60911 50套 专用洗柱液 70903b 50mL DNA洗脱液2.0 111205 10mL 使用手册 70903sc 1份 运输及保存 常温运输及保存，溶液A长期保存需要放4℃，有效期一年。 自备试剂 无 使用方法 1. 用塑料离心管收集不超过3mL过夜培养的饱和新鲜菌液，室温 12000-15000g 离心半分钟，弃上清 （培养基）。注意:不能超过3mL菌液，否则质粒回收率将 急剧降低。必须使用新鲜菌液，不能使用冻存的细菌沉淀和静置的细菌培养液。 2. 加入0.7mL溶液A，充分吹打或振荡裂解细菌直到裂解变澄清，一般需要半分 钟左右。注:此方法不同于碱裂解法，此步需要充分吹打，使基因组DNA断裂。 3. 将裂解液全部转移到离心吸附柱中，不需要静置，直接进入下一步。 4. 室温 14000-15000 rpm离心2-5分钟，弃穿透液。一般菌液越多需要离心的 时间就越长。如果还有少量液体不能离心过柱，还可以延长离心时间直到所有液 体成功过柱。如果离心速度低于 14000rpm，需要的离心时间会更长。需要注意 有的离心机标注的离心速度跟实际的速度不符合，这种情况下，可以使用离心机 的最大离心速度离心。 5. 在离心吸附柱中加入0.7mL的通用洗柱液，室温 12000rpm离心半分钟，弃穿