2017版生物化学教学大纲.docVIP

《生物化学实验》教学大纲 课程中文名称：生物化学实验 课程英文名称：Biochemistry Experiment 课程编号：J7023 学分：2 学时：32 先修课程：有机化学、物理化学 适用专业：生物科学 课程类别：专业核心课程/必修 使用教材：《生物化学实验》 刘士平、龚美珍 主编，华中科技大学出版社，2014年6月第1版 开课单位：生物与制药学院 一、实验性质、目的与任务 生物化学实验是生物科学专业核心课程。通过本实验的教学，使学生掌握生物化学实验的基本操作及实验技术，掌握生物大分子的分离纯化、定性、定量、化学性质、生物活性的鉴定，学会相关仪器设备的操作，培养学生动手能力和科学的思维能力，提高学生的创新意识、合作精神和解决实际问题的能力。 二、教学目标： 1. 本课程支撑专业培养计划中毕业要求3； 2. 本课程支撑专业培养计划中毕业要求3中的所有指标点：能够使学生具备生物学科学研究的基础能力，掌握群体、个体、细胞和分子等生物学不同层次的分析方法与实验技术。占指标点达成度的20%。 三、实验项目内容及学时安排 序号 实验项目 学时 实验性质 备注 验证 设计 综合 必做 选做 1 生物大分子的特征反应 4 √ √ 2 总糖的定量测定 4 √ √ 3 油脂碘值、过氧化值和酸价的测定 4 √ √ 4 氨基酸的分离鉴定——纸层析 3 √ √ 5 血清蛋白的醋酸纤维薄膜电泳 3 √ √ 6 维生素C的定量测定 2 √ √ 7 酵母RNA的分离及组分鉴定 4 √ √ 8 聚丙烯酰胺凝胶垂直电泳 8 √ √ 9 质粒DNA的提取 6 √ √ 10 琼脂糖凝胶电泳技术检测质粒DNA 3 √ √ 11 DNA片段的PCR扩增 4 √ √ 四、各实验项目的具体内容及教学目的要求 实验一、生物大分子的特征反应 实验内容 糖的颜色反应 糖的还原作用 蛋白质的颜色反应 蛋白质的沉淀及变性 教学要求 理解生物大分子的特征反应原理。 掌握糖的颜色反应、还原作用和蛋白质的鉴定和沉淀反应。 思考作业 （1）盐析法沉淀蛋白质时，往往需要将pH调到蛋白质等电点附近，为什么？ 实验二、总糖的定量测定 1. 实验内容 （1）标准曲线的制作 （2）样品中总糖的测定 （3）计算样品中总糖的含量 2. 教学要求 （1）理解分光光度计使用原理。 （2）掌握DNS比色法测定总糖的方法。 3. 思考作业 （1）简要叙述分光光度计的使用原理和使用方法。 实验三、油脂碘值、过氧化值和酸价的测定 1. 实验内容 （1）油脂碘值的测定 （2）油脂过氧化值的测定 （3）油脂酸价的测定 2. 教学目的 （1）掌握测定脂肪酸不饱和双键含量的原理。 （2）掌握脂肪碘值测定的操作步骤。 （3）掌握油脂过氧化值测定的原理和方法 （4）掌握油脂酸价测定的原理和方法 3. 思考作业 （1）何谓碘值？具有什么意义？ （2）液体油和固体脂碘值间有何区别？ 实验四、氨基酸的分离鉴定——纸层析 实验内容 裁剪滤纸并点样 用有机溶液分离氨基酸 对氨基酸进行显色 2. 教学要求 （1）理解纸层析分离氨基酸的原理 （2）掌握用纸层析法分离氨基酸的方法。 3. 思考作业 （1）试阐述纸层析分离鉴定氨基酸的原理和操作步骤。 （2）茚三酮是否可用于氨基酸和蛋白质的定性鉴定？说明你的理由。 （3）何谓Rf值？影响Rf值的主要因素是什么？ 实验五、血清蛋白的醋酸纤维薄膜电泳 实验内容 检查电泳仪 点样 电泳 染色 洗脱并观察 2. 教学要求 （1）理解醋酸纤维素薄膜电泳的原理。 （2）掌握醋酸纤维薄膜电泳的操作过程。 3. 思考作业 （1）用醋酸纤维薄膜做电泳支撑物有什么优点？ 实验六、维生素C的定量测定 实验内容 样品处理 样品用标准硫酸铜溶液进行滴定 空白对照实验 计算Vc的含量 2. 教学目的 （1）掌握定量维生素C的原理和方法。 3. 思考作业 （1）请阐述维生素C测定的原理。 实验七、酵母RNA的分离及组分鉴定 1. 实验内容 （1）提取RNA样品 （2）嘌呤碱、核糖和磷酸根的鉴定 2. 教学目的 （1）理解酵母RNA提取的原理。 （2）掌握从酵母中分离核酸的方法。 3. 思考作业 RNA在碱性溶液中很溶液降解，请解释其原理。 在酵母RNA的分离和组分鉴定中，得到的RNA组分是什么？怎样验证的？ 实验八、聚丙烯酰胺凝胶垂直电泳 实验内容 （1）配制分离胶并灌胶 （2）制备浓缩胶并灌胶 （3）上样 （4）电泳 （5）染色、脱色并观察结果 2. 教学要求 （1）理解聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白质分子量的原理。 （2）掌握聚丙烯酰胺凝胶电泳的操作过程。 3. 思考作业 （1）请简要叙述垂直平板电泳的优点？ （2）试述聚