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- 2018-04-15 发布于河南
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2014届高考生物(人教全国通用)一轮复习《选修1专题五DNA和蛋白质技术
一、DNA的粗提取与鉴定 1.实验材料的选择: 选用DNA含量相对较高的生物组织,如鸡血、菜花、洋葱等。 2.提取原理:DNA与杂质的溶解度不同,DNA与杂质对酶、高温、洗涤剂的耐受性不同。 3.步骤: (1)破碎细胞:动物细胞(以鸡血为例),加入蒸馏水,同时用玻璃棒搅拌,过滤后收集滤液。植物细胞(以洋葱为例),加入洗涤剂和食盐 ,充分研磨和搅拌,过滤后收集研磨液。 (2)去除杂质:利用DNA在不同浓度的NaCl溶液中 溶解度 不同,去除杂质。 (3)DNA析出:在处理后的滤液中加入 等体积、冷却的酒精 溶液,析出DNA。 (4)DNA的鉴定:加入 二苯胺 试剂,沸水浴,出现浅蓝色。 二、PCR技术:全称是 多聚酶链式反应。 1.PCR原理:利用了DNA的热变性原理,通过控制温度来控制双链的解聚与结合。 2.PCR反应的条件:①缓冲液;② DNA模板; ③ 两种引物; ④四种脱氧核苷酸;⑤Taq DNA聚合酶。 3.PCR的反应过程 (1)变性:温度上升到90℃以上,双链DNA在热作用下,氢键断裂,形成两条单链DNA。 (2)复性:温度下降到50℃左右,两种引物通过碱基互补配对原则与两条单链DNA结合。 (3)延伸:温度上升到 72℃ 左右,在 TaqDNA聚合 酶的作用下,以 四种脱
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