细胞生物学试验教授教化纲目.doc

细胞生物学实验教学大纲 文档来自网络，是本人收藏整理的，如有遗漏，差错，还请大家指正！ 　　　　　　　《细胞生物学实验》教学大纲 学时：21 学分： 课程性质：必修 实验个数：4 适用专业：生物系各专业 大纲执笔人：康美玲 大纲审定人：王洪凯 一、课程的性质与任务 　　细胞生物学实验课程是生命科学学院本科各专业一门重要的必修基础课程，在生命学科的本科教学中有着十分重要的地位 课程内容包括基础验证和基本技能性实验；综合性实验和开放式、研究型、创新性实验三大类 基础验证和基本技能性实验主要是配合理论课的教学，使学生加深理解和掌握有关的知识，同时能够规范地掌握细胞生物学研究的基本操作与基本的实验技能 综合性实验和开放式、研究型、创新性实验，目的旨在培养和提高学生实验设计和应用各种实验技术的能力，培养和训练学生的创新意识和创新能力，培养严谨的科学态度和实事求是的作风，提高发现问题、分析问题和解决问题的能力，为今后独立从事科学研究打下坚实的基础 二、实验的目的与要求 1. 配合理论课教学，加深和巩固所学的知识 2. 掌握细胞生物学研究有关的基本技术，学习先进的研究方法和技能 3. 通过开放式、研究型、创新性实验训练，培养和提高学生的实验设计能力，实验动手能力以及文献查阅、论文写作的能力 4. 通过开放式、研究型、创新性实验训练，培养学生的科学思维方法，提高发现问题、分析问题和解决问题的能力 　　在实验教学过程中，要求学生除了掌握基本的操作技能外，实验室还做到全开放，为学生提供进行开放式、研究型、创新性研究的场所，学生可以个人或小组的形式根据自己所学知识、兴趣设计研究课题进行实验 参加学校组织的科技大赛 三、实验项目与内容提要 序号 　　　　实验 　　　　项目 学 时 必 开 选 开 实 验 类 型 内容 提要 基本 综合 设计 1 血涂片的制备和细胞大小的测量 3 ∨ ∨ 认识红细胞及各种白细胞的典型形态，掌握显微测微尺的使用方法 2 脂类、DNA、RNA的细胞化学 4 ∨ ∨ 了解脂类、两种核酸在真核细胞中的分布 3 　　死活细胞鉴别 3 ∨ ∨ 掌握死活细胞鉴别的原理及方法，了解细胞存活率在研究中的应用和意义 4 细胞器的分离与观察 4 ∨ ∨ 了解细胞器的分离原理，掌握差速离心和密度梯度离心技术 5 叶绿体的分离与荧光观察 3 ∨ ∨ 了解细胞器分离的一般原理方法，观察叶绿体的自发荧光和次生荧光，熟悉荧光显微镜的使用方法 6 细胞融合 4 ∨ ∨ 了解PEG诱导细胞融合的基本原理，通过PEG诱导鸡红细胞之间的融合实验，初步掌握细胞融合技术 7 动物血细胞的电融合技术 4 ∨ ∨ 本实验使学生在了解电融合原理的基础上，学会掌握各种细胞悬液的制备及电融合过程的操作 8 植物原生质体的分离和培养 4 ∨ ∨ 原生质体是除去细胞壁的裸露细胞 在适宜的条件下，分离的原生质体能够再生细胞壁，进行细胞分裂，并再生完整植株 通过实验，掌握原生质体分离和培养的基本方法，并对培养结果进行观察和分析 9 细胞膜的渗透性 2 ∨ ∨ 了解细胞膜的渗透性及各类物质进入细胞的速度 10 细胞凝集反应 2 ∨ ∨ 掌握细胞凝集反应的实验方法及细胞凝集的原理 四、实验内容安排 实验一 血涂片的制备和细胞大小的测量 一、 目的与要求 1. 掌握血涂片的制备方法 2. 认识红细胞及各种白细胞的典型形态 3. 掌握显微测微尺的使用方法 二、实验原理 将血液样品制成单层细胞的涂片标本，经瑞氏染液染色后，不同白细胞中的颗粒可以呈现不同的颜色 碱性粒细胞的颗粒呈蓝紫色，酸性粒细胞的颗粒呈橘红色，中性粒细胞的颗粒呈粉红色 根据细胞中颗粒的颜色、大小及多少，再结合细胞的大小及细胞核的形态，就可以将白细胞进行分类计数 三、实验材料 　　医用一次性采血针、酒精棉球、镊子、载玻片、目镜测微尺和镜台测微尺 四 、实验内容 1. 学习血涂片的制备方法以及对各种血细胞的形态及染色的观察与鉴别 2. 学习使用显微测微尺：包括目镜测微尺和镜台测微尺 实验二 细胞化学实验 一、 目的与要求 熟悉细胞脂类的显示技术，了解其在细胞中的分布；学习区别定位细胞DNA、RNA的显示方法 二、 原理 　　（1）苏木精为碱性染料染细胞核，苏丹红为偶氮脂溶性染料，可显示细胞中的脂类的分布及量； （2）甲基绿与DNA双螺旋外侧的磷酸根基团结合力强，结合后阻止派洛宁从碱基之间插入 甲基绿与DNA的结合产物为绿色 派洛宁与RNA的结合力强，RNA结构较松散，派洛宁可以插入，从而中和磷酸基团，阻止甲基绿染色，派洛宁与RNA的结合物呈红色，根据颜色的部位可以判断DNA和RNA的定位并且判断两种核酸的相对含量 三、 实验材料 水浴锅、冰冻切片机、载玻片等； 猪肝、花生子叶、 四、 实验