生物化学精品教学（复旦大学）蛋白质生物合成.pptVIP

四环素族 氯霉素 链霉素和卡那霉素 嘌呤霉素 放线菌酮 二、干扰蛋白质生物合成的生物活性物质 某些毒素能在肽链延长阶段阻断蛋白质合成而呈现毒性，如白喉毒素是真核细胞蛋白质合成的抑制剂，它作为一种修饰酶，可使eEF-2发生ADP糖基化共价修饰，生成eEF-2腺苷二磷酸核糖衍生物，使eEF-2失活。 1．白喉毒素(diphtheria toxin) 白喉毒素的作用机理： 白喉毒素 + + 延长因子-2 （有活性） 2. 干扰素 干扰素(interferon, IFN)是真核细胞被病毒感染后分泌的一类具有抗病毒作用的蛋白质，可抑制病毒的繁殖。 干扰素分为α-（白细胞）型、β-（成纤维细胞）型和γ-（淋巴细胞）型三大类，每类各有亚型，分别具有其特异作用。 干扰素抑制病毒的作用机制有两方面： 一是干扰素在某些病毒双链RNA存在时，能诱导特异的蛋白激酶活化，该活化的蛋白激酶使eIF-2磷酸化而失活，从而抑制病毒蛋白质合成； 二是干扰素能与双链RNA共同活化特殊的2ˊ-5ˊ寡聚腺苷酸（2ˊ-5ˊA）合成酶，催化ATP聚合，生成单核苷酸间以2ˊ-5ˊ磷酸二酯键连接的2ˊ-5ˊA，经2ˊ-5ˊA活化核酸内切酶RNase L，后者可降解病毒mRNA，从而阻断病毒蛋白质合成。 干扰素的作用机制: 干扰素诱导的蛋白激酶 dsRNA ①干扰素诱导eIF2磷酸化而失活 ATP eIF2 ADP eIF2-P（失活） Pi 磷酸酶 ② 干扰素诱导病毒RNA降解 * * * * * * Gro EL-Gro ES反应 从核糖体释放出的新生多肽链不一定是具备生物活性的成熟蛋白质，必需经过各种翻译后修饰、加工过程才转变为有活性的成熟蛋白。 主要包括： 多肽链的有限水解 氨基酸侧链化学修饰 二硫键形成 二、蛋白质的翻译后修饰 1.切除N-端的甲酰基或甲硫氨酸 细胞内的脱甲酰基酶或氨基肽酶可以去除N-甲酰基、N-末端蛋氨酸。 真核细胞分泌性蛋白和跨膜蛋白前体的N-端都有一13～36个氨基酸残基（以疏水氨基酸残基为主)的肽段——信号肽(signal peptide)，这些信号肽在蛋白质成熟过程中需要被切除。 （一）多肽链的有限水解 例：促黑皮素原(POMC)的水解修饰 2. 肽链中肽键水解 （二）氨基酸残基侧链的化学修饰 概念： 在肽链生物合成的同时或合成后，在酶的催化下糖链被连接到肽链上的特定糖基化位点的过程。 1. 糖蛋白糖基化 糖链的合成由四类分子协调完成 糖基转移酶 糖苷酶 糖基供体 糖基接受体 连接方式 目 录 N-连接： O-连接： O N （1）N-连接型糖蛋白 定义： 聚糖的N-乙酰葡糖胺与多肽链中Asn-X-Ser （NXS/T）序列的天冬酰胺残基的酰胺氮以共价键连接称N-连接糖蛋白。 糖基化位点： N-连接糖蛋白中Asn-X-Ser/Thr三个氨基酸残基组成的序列子称为糖基化位点。 N-聚糖的加工过程 （2）O-连接型糖蛋白 定义： 聚糖的N-乙酰半乳糖胺与多肽链的丝/苏氨酸残基的羟基以共价键相连，称为O-连接糖蛋白。 O-连接聚糖结构： O-连接聚糖有N-乙酰半乳糖胺与半乳糖构成核心二糖，核心二糖可重复延长及分支，再接上岩藻糖、N-乙酰葡糖胺等单糖。 O-连接聚糖合成： O-连接寡糖在N-乙酰半乳糖基转移酶的作用下，在多肽链的丝/苏氨酸的羟基上连接上N-乙酰半乳糖基，然后逐个加上糖基直至O-连接聚糖链的形成。 O-连接聚糖特点： 与丝/苏氨酸侧链的羟基连接的只有单糖基的O-GlcNAc; 这种糖基化修饰方式存在于细胞质和细胞核中。 2. 磷酸化 蛋白质磷酸化主要发生在两种氨基酸上：一种是丝氨酸（包括苏氨酸），另一种是酪氨酸。 少数双功能酶可同时作用于这两类氨基酸，如促丝裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase, MAPK）。 蛋白酪氨酸激酶转导细胞增殖与分化信号 蛋白质酪氨酸激酶（Protein Tyrosine kinase，PTK）催化蛋白质分子中的酪氨酸残基磷酸化。 酪氨酸磷酸化作为细胞信号转导和酶活性调控的一种主要方式,通常通过引发蛋白质之间的相互作用进而介导信号通路。 几乎所有的多肽细胞生长因子都是通过此途径来激活细胞，刺激细胞生长。 酪氨酸磷酸化在细胞的所有磷酸化修饰中所占比例非常低。 蛋白质的磷酸化与去磷酸化修饰 3. 乙酰化 4. 甲基化 将活性甲基化合物（如S-腺苷基甲硫氨酸）的甲基催化转移到其他化合物的过程。 蛋白质的乙酰化与去乙酰化修饰 三、蛋白质合成后的靶向输送 蛋白质在核蛋白体上合成后，必须分选出来，定向输送到一个合适的部位才能行使各自的生物学功能，这个过程称为靶向输送。 两个