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免疫学实验整理 一、凝集试验、吞噬试验 （一）凝集试验 1、直接凝集反应（ABO 血型鉴定） 2、间接凝集反应（类风湿因子测定） 3、金黄色葡萄球菌协同凝集试验 （二）吞噬试验（示教） 1、中性粒细胞的吞噬作用（小吞噬） 2、巨噬细胞的吞噬作用（大吞噬） 名解： 1.免疫学检测技术：利用免疫学原理来检测抗原、免疫分子（抗体、补体、细胞因子和粘附 分子等）及免疫细胞等免疫学研究对象的实验过程。如凝集反应可用于检测抗原抗体，吞噬 十堰可用于检测免疫细胞等。 2.凝集反应（agglutination reaction ）:在一定浓度的电解质溶液中，颗粒性抗原与相应抗体结 合后，出现肉眼可见的凝集块，称为凝集反应。 3.直接凝集反应（direct agglutination reaction ）:细菌、细胞等颗粒性抗原，在适当电解质参 与下可直接与相应抗体结合出现凝集，称为直接凝集反应。 4. 间接凝集反应（indirect agglutination reaction ）：将可溶性抗原或抗体先吸附于适当大小的 颗粒性载体表面（这种载体与免疫无关），然后与相应抗体或抗原结合，在适量的电解质存 在下，出现特异性凝集现象，称为间接凝集反应。 5.协同凝集实验（coagglutination ）：利用金黄色葡萄球菌 A 蛋白（SPA ）能与人和多种哺乳 动物 IgG 的Fc 段结合而不影响其 Fab 段功能的特性，将已知的特异性抗体吸附于金黄色葡 萄球菌上，与相应的抗原发生的凝集反应即为协同凝集试验。 6.滴度（titer ）、效价：The maximum dilution that gives obviously visible agglutination (++) is called the titer. 实验及注意点： 1、检测抗原抗体的基本原则：根据抗原抗体结合反应的高度特异性，用已知抗体（抗原） 检测未知抗原（抗体），有现象则说明有相应抗原，无现象则无相应抗原。 2、直接凝集反应（ABO 血型鉴定）：若加A 抗体出现凝集说明血清中有A 抗原，为A 型血。 凝集时红细胞凝集成块。 3、间接凝集反应（类风湿因子测定）：人丙种球蛋白吸附在红细胞上成为致敏红细胞，再 用致敏红细胞检测类风湿关节炎患者血清中的类风湿因子（抗变性 IgG 抗体）。此实验 中以“++ ”的血清最高稀释度作为试验效价，效价1:40 则阳性。 4 、金黄色葡萄球菌协同凝集试验： 1 2 3 致敏金葡菌+脑脊液 致敏金葡菌+生理盐水 未致敏金葡菌+脑脊液 凝集（脑脊液中A 群脑膜炎球菌阳性） 不凝集 不凝集 5、中性粒细胞的吞噬作用（小吞噬）；巨噬细胞的吞噬作用（大吞噬） 6、吞噬百分率= （吞噬的中性粒细胞数）/ （观察记录的中性粒总数（100））×100% 7、吞噬指数= （被吞噬的细菌总数）/ （观察记录的吞噬细胞总数（100））【书上和老师课 件上有出入，此为书上版】 二、沉淀试验、溶血反应 （一）沉淀反应 1、单向琼脂扩散试验（示教） 2、双向琼脂扩散试验 3、对流免疫电泳试验 （二）补体参与的免疫反应 1、溶血反应 2、补体结合试验（原理） 名解： 1.沉淀反应（precipitation）：可溶性抗原如血清、毒素、细菌浸出液等与相应抗体结合，当 两者比例合适、并有适量电解质存在时，形成肉眼可见的沉淀物或沉淀线，称为沉淀反应。 单项琼脂扩散实验（未做）：定量实验。将一定量抗体和琼脂混合倾注于玻璃板上，凝固后 在琼脂层中打孔，再将抗原加入孔中。孔中抗原向四周扩散，在抗原与抗体比例合适处呈现 白色沉淀环，沉淀环直径大小与抗原浓度成正比。 2.双向琼脂扩散实验：定性或半定量实验。将可溶性抗原和抗体分别加入到琼脂板相对应的 孔中，两者各自向四周扩散，如果抗原与抗体相对应，则在两者比例合适处形成白色沉淀线。 根据沉淀线位置、形状等可对抗原或抗体做出定性分析。 3.对流免疫电泳：蛋白质抗原