机能学实验设计兔子是否肾内是否存在乙酰胆碱能舒血管.docVIP

机能学实验设计大纲 实验名称：兔肾内是否存在乙酰胆碱能舒血管纤维 [5] 陈主初，吴瑞生主编，实验动物学，第1版，湖南科学技术出版社，2001. [6] 杨世杰主编，药理学，第1版，人民卫生出版社，2001 [7]BarijiaasL,et al,light and Electron mieroscopic Localization of acetylchlinesterase activity in the rat renal nerve ,Am[J]Anat,1976,147,219-239 [8] 张荣宝主编，植物性神经系统生理与临床，第1版，人民卫生出版，1994,298-299 [9] 吴德昌，孙毅久等编译，人体机能解剖学，第1版，科学技术出版社，1983.471 [10]杨藻宸主编，药理学和药物治疗学，第1版，东南大学出版社,2000.149. [11]王汝龙，金有豫主编，新编临床药物手册，第二版，重庆出版社,1999.382,4 二、实验设计方案（实验设计目标,拟解决的主要问题，实验材料，实验设计方法，实验结果，实验讨论，实验结论）。 （一）实验设计目标，拟解决的关键问题 设计目标：在功能上探索肾内是否存在乙酰胆碱介导的舒血管神经纤维 拟解决的关键问题：在功能上肾内是否存在乙酰胆碱介导的舒血管神经纤维进行探索 （二）实验设计 1、材料 同一近交系的新西兰兔2只，BioLab-410计算机实时分析系统，哺乳类手术器械，压力换能器，电子刺激器，计滴器 2、实验设计方法 （1）通过交叉配血实验，确定两只兔子血型相同（分别标记为A，B），编为一组。从耳缘静脉注射1%戊巴比妥钠2、5ml/kg进行全麻。 （2）A兔颈动脉插管用于测血压。 （3）分离B兔左侧迷走神经。 （4）分别进行腹腔手术，均分离其左肾动静脉。 （5）插管连通A兔肾动脉近心端和B兔肾动脉远心端，以及A兔肾静脉近心端和B兔肾静脉远心端。 （6）在肾动脉的连通管上安装两个三通，分别用于注药和接压力换能器间接测量肾动脉血压变化。 （7）游离A兔右肾和B兔左肾的输尿管，分别插管计尿滴。 （8）待两兔血压及尿量稳定后，切断Ｂ兔左侧迷走神经前后分别刺激其外周端，并记录血压及尿量变化。 （９）向B兔左肾的供血动脉注射2、5%妥拉苏林0、3ml/kg[4],观察记录血压及尿量变化。 （10）待血压及尿量变化稳定后，同法注射0、5%阿托品0、2ml/kg[4],观察记录血压及尿量变化。 3、实验结果 1、刺激迷走神经。PA-A兔颈动脉压，PL-连通管血压，均无变化。 2、切断迷走神经。PA、PL均无变化。 3、切断后刺激迷走神经外周端。ＰＡ、ＰＬ均无变化。 4、注射妥拉苏林后，PA无变化，PL在给药后一分钟后出现增高并维持3-4分钟。 5、注射阿托品，给药一分钟后，PA，PL同步呈周期性下降，并保持于注射前低的水平。 4、讨论 刺激未切断的迷走神经，动脉连通管和A兔颈总动脉均无变化趋势，表明刺激迷走神经并没有对肾内血压造成变化，同时也没有产生影响血压的物质进入血液。即迷走神经并未进入肾内，胆汁从功能上，而为形态学上证明。 注射妥拉苏林，舒张血管，降血压，然而，注射后PL无下降，可能是因为肾的自身调节保持血压的稳定，结果是扩张血管增加血量而无血压变化。 切断迷走神经后，刺激外周端，PL和PA无改变趋势，进一步支持上述推断。 阿托品可阻断迷走神经突触前膜MI受体，使Ａｃｈ释放增加，抑制心功能[6］． 5、肾内不存在乙酰胆碱能舒血管纤维。