基因工程的操作工具复习课件 新人教版选修3.pptVIP

考点一、基因工程的概念 通俗的说，就是按照人们的意愿，把一种生物的某种基因提取(复制)出来，加以修饰改造，然后放到另一种生物的细胞里，定向地改造生物的遗传特性。 基因工程概念解读： 例．(2010·全国卷Ⅱ)下列叙述符合基因工程概念的是 (　　) A．B淋巴细胞与肿瘤细胞融合，杂交瘤细胞中含有B淋巴细胞中的抗体基因 B．将人的干扰素基因重组到质粒后导入大肠杆菌，获得能产生人干扰素的菌株 C．用紫外线照射青霉菌，使其DNA发生改变，通过筛选获得青霉素高产菌株 D．自然界中天然存在的噬菌体自行感染细菌后其DNA整合到细菌DNA上 什么叫平末端？ 1、限制酶和DNA解旋酶的区别？ 2、限制酶和DNA水解酶的区别？ 2、“分子缝合针”——DNA连接酶 相关酶的分类比较 小结 * * * * 基因工程 1、概念 2、基本工具 3、操作程序 4、实例 5、应用 6、蛋白质工程 新泰一中北区生物组 【考纲要求】： 1、基因工程的诞生 Ⅰ 2、基因工程的原理及技术 Ⅱ 3、基因工程的应用 Ⅱ 4、蛋白质工程 Ⅰ 本考点命题方向预测： （1）、从考查内容上分析；基因工程是生物工程的重要领域，常与其它技术组合运用而达到定向改造生物的目的。 （2）、基因工程的内容是当前生命科学研究的热点和前沿，因此是考查的重点内容，可出现以材料分析题、开放试题等为主的多种题型。 基因拼接成功的原因 实例 成功表达原因 不足 优点 结果 基本过程 操作水平 操作对象 操作环境 基本原理 基因重组 体外 DNA 分子水平 剪切——拼接——导入——表达 新的生物类型和生物产品 密码子的通用性：生物界共用一套相同的密码子 ①基本单位同②空间结构同③碱基配对方式同 安全性问题：生物安全、食品安全、环境安全 转基因抗虫棉 ①打破生殖隔离②定向改造生物③时间短 B 二、DNA 重组技术的基本工具： 1、准备切割DNA的工具（“分子手术刀”） ──限制酶 2、DNA片段的连接工具（“分子缝合针” ） ──DNA连接酶 3、基因转移工具（“分子运输车”） ──运载体 注意：①区分工具和工具酶 ②限制酶和DNA连接酶的化学本质、作用、作用特 点、作用所需条件？均与酶相同 ③基因表达载体的构建所需的工具有哪些？ 原核生物（微生物） 4000种。 1、限制性核酸内切酶 一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列并且能在特定的切点上切割（磷酸二酯键）DNA分子(酶的专一性) （1）、来源： （2）、种类： （3）、特点： （一）工具酶 （4）限制酶的识别序列： 能被限制性内切酶特异性识别的切割部位都具有回文序列：在切割部位，一条链正向读的碱基顺序与另一条链反向读的顺序完全一致。 （5）限制性核酸内切酶的作用部位 磷酸二酯键 即脱氧核糖、磷酸之间的连接 G P A P A T G G C A T C T T C G A A 什么叫黏性末端？ 被限制酶切开的DNA两条单链的切口，带有几个伸出的核苷酸，他们之间正好互补配对，这样的切口叫黏性末端。 （6）作用结果 黏性末端、平末端 当限制酶从识别序列的中心轴线处切开时，切开的DNA两条单链的切口，是平整的，这样的切口叫平末端。 断开：磷酸二酯键？氢键？ 都断开磷酸二酯键 产物：DNA片段？单个脱氧核苷酸？ 3、切取目的基因需切割几次？切口数量？ 2、4 4、如何防止切下的目的基因自身环化？ 不同限制酶切割 例1.据右图所示，有关工具酶功能的叙述不正确的是（　 ） A. 限制性内切酶可以切断a处，DNA连接酶可以连接a处 B. DNA聚合酶可以连接a处 C. 解旋酶可以使b处解开 D. 连接C处的酶可以为DNA连接酶 D 例2.下列有关基因工程中限制酶的描述，错误的是 A.一种限制酶只能识别一种特定的脱氧苷酸序列 B.限制酶的活性受温度的影响 C.限制酶能识别和切割RNA D.限制酶可从原核生物中提取 C ①作用对象: 把切下来的DNA片段拼接成新的DNA，即将脱氧核糖和磷酸连接起来. ②作用部位： 催化磷酸二酯键形成 ③类型： 不同类型DNA连接酶的比较： ③类型： 类型 E·coliDNA连接酶 T4DNA连接酶 来源 功能 大肠杆菌 T4噬菌体 恢复 磷酸 二酯键 只能连