第11章 遗传重组 题解.pdfVIP

遗 传 重 组 遗传重组的结果引起 ＤＮＡ重排，其生物学意义在于它提供了有利（或不利）的个体基因 差异和遗传多样性，同时，遗传重组通常包括一些ＤＮＡ的修复合成。遗传重组分为三种类 型：同源重组、位点专一性重组和异常重组。异常重组主要指转座，是生物突变的重要来源， 在基因组进化中起着重要的作用。 同源重组是重组的普遍形式，Ｈｏｌｌｉｄａｙ模型较好地解释了同源重组的机制和基因转变现 象。Ｈｏｌｌｉｄａｙ模型主要是通过一个包括 ＤＮＡ分子断裂、融合和修复的过程来说明重组和基 因转变的分子机制。 位点专一性重组实现了游离的 ＤＮＡ整合到细菌ＤＮＡ中和 原噬菌体 ＤＮＡ从细菌染 λ λ 色体 ＤＮＡ上的切离的过程，整合和切离受严格的遗传机制控制。 转座是生物细胞中普遍存在的现象，由一种位于转座子内的基因所编码的转座酶催 化。转座元件是基因组的重要组成部分，占人类基因组的４０％以上，如通过逆转录转座的 活动导致在人类基因组中Ａｌｕ因子超过 １００万个，占到了人类基因组的１０％，并且，转座元 件明显对染色体结构的塑造、基因表达的调节、基因组的进化具有重要作用。转座元件富 有多样性，在包括细菌、真菌、原生生物、植物和动物的各种类别的生物中都含有不同的转 座元件，如玉米中的Ａｃ－Ｄｓ，原核生物中的ＩＳ、Ｔｎ、Ｍｕ，果蝇中的Ｐ因子、ＦＢ因子、Ｃｏｐｉａ因 子等。 根据转座方式的不同，大多数转座元件可归属于三种类型中的一种：剪切 －粘贴转 座子（ｃｕｔａｎｄｐａｓｔｅｔｒａｎｓｐｏｓｏｎ），通过把一个元件从染色体原来的位置上切下并插入到其 他位置上完成转座，这种转座元件在原核生物和真核生物中都有发现；复制转座子（ｒｅｐｌｉ ｃａｔｉｖｅｔｒａｎｓｐｏｓｏｎ），通过包括转座元件 ＤＮＡ的复制过程完成转座，这种转座元件只在原核 生物中有发现；逆转录转座子（ｒｅｔｒｏｔｒａｎｓｐｏｓｏｎ），通过以转座元件的ＲＮＡ为模板逆转录合 成 ＤＮＡ分子，然后再插入到染色体上新的位置而完成转座，这种转座元件仅在原核生物 中发现。 转座可导致广泛的遗传学效应，它大大提高了生物的总突变速率。然而，新的插入突变 在自然界却是一个稀有事件，这说明转座过程是受到调控的。大量研究表明，表观遗传的调 节机制如甲基化、异染色质化及 ＲＮＡ干扰（ＲＮＡｉ）都是控制转座子过度移动的防卫手段，表 观遗传沉默机制在转座子表达的调控中起着重要作用。 几乎每一种生物中都存在转座子，如果利用生物自身的转座子来研究本生物的基因，不 仅简便，而且有相对较少的生物安全性问题。另一方面，生物基因组大部分是由转座子构 成，研究转座子就是研究基因组，转座子两端重复序列的特点使分子跟踪成为可能，可以移 第 １１章　遗 传 重 组　１１５ 动的特点使它成为一种高效的标记。利用转座子转座引起基因突变，从而造成表型改变的 原理所进行的基因克隆方法———转座子标签法（ｔｒａｎｓｐｏｓｏｎｔａｇｇｉｎｇ）是最早也是最常见的转 座子应用技术之一。 基因工程是现代重要的生物技术，它是遗传重组原理和技术的应用，现已在农业、工业、 医药、环保等领域对人类产生巨大影响。基因工程包括５个基本步骤：获取目标基因、构建 表达载体、转化、检测与鉴定、安全性评估。 重要概念剖析 遗传重组（ｇｅｎｅｔｉｃｒｅｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ）：又称基因重组，是指不同ＤＮＡ链的断裂和连接而 产生 ＤＮＡ片段的交换和重新组合，从而形成新的ＤＮＡ分子的过程。 同源重组（ｈｏｍｏｌｏｇｏｕｓｒｅｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ）：又称普遍性重组（ｇｅｎｅｒａｌｉｚｅｄｒｅｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ）， 是指发生在同源 ＤＮＡ序列之间的重组，它的发生依赖于大范围ＤＮＡ同源序列的联会，此 外还需要蛋白质的作用，如大肠杆菌的ＲｅｃＡ蛋白，因此，细菌中的同源性重组又称为依赖 ＲｅｃＡ重组（ＲｅｃＡｄｅｐｅｎｄｅｎｔｒｅｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ）。同源重组时，同源区越长越有利，大肠杆菌活 体重组，至少要求有 ２０～４０ｂｐ同源；大肠杆菌与 噬菌体或质粒重组，其同源区要求 λ １３ｂｐ；枯草杆菌基因与质粒的重组，同源区的长短应 ７０ｂｐ；