5氮胞苷联合流体切应力体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞分化为心肌样细胞的初步分析 word格式.docxVIP

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2018-04-24 发布于上海
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5氮胞苷联合流体切应力体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞分化为心肌样细胞的初步分析 word格式.docx

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5氮胞苷联合流体切应力体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞分化为心肌样细胞的初步分析 word格式

striatedmuscleα-actinexpression,then10umol/Lfor24hourswasestablishedasoptimalinductionconditions.Experimentwasundertheoptimalconcentrationof10μmol/Lfor24h.Theexpressionofα-actin,desminandcTnIwereidentifiedbyimmunofluorescencecytochemistryin7,14,21,28 days.Results:1.Considerthesurvivalofthecellsandα-actinpositiverate,10umol/Lfor24hourswas establishedasoptimalinductionconditions.⒉Thecellvolumeandnucleusincreased,andstretchedouttuberswithdifferentsize,anddifferentdirections,similartocardiac-likecellgrowthafter5-Azainduced.⒊Underconditionof10umol/Lfor24hours,7daysidentifiedbyimmunofluorescencestainingtechnique,therewasnoexpressionofα-actin,desmin,cTnIatthe7thday.Whileasmallamountofexpressionofα-actin,desminexistatthe14thday,butnocTnI.Expressionof α-actin,desminincreaseinthenumberofcellsatthe21thdayandasmallnumberofcellswerevisible expressionofcTnI.Thenumberofcellswithexpressionof α-actin,desmin,cTnIincreasedfurtheratthe28thday.Part 3Effectoffluidflow-inducedshearstressondifferentiationofBMSCsintoCardiomyocyte-likeCellsinducedby5-AzacytidineObjective:Toexploretheroleofthefluidflow-inducedshearstressinthedifferentiationof BMSCsintoCardiomyocyte-likeCellsinducedby5-AzacytidineMethods:The4thgenerationBMSCswereseededintheslide,withafinalconcentrationof 5-Azawas10μmol/L.SlideswerefixedinparallelplateflowchamberintheCleanBenchesplacedafter24hoftheintervention.thefluidshearstressloadingdevicewasconductedbychangingtheflowofcirculatingfluid.Groups:fluidshearstresswere5dyne/cm2,15dyne/cm2,25dyne/cm2reactivefor24hrespectively,thecontrolgroupdidnotreceivemechanicalstimulation.Aftertheinterventionofmechanicalloading,morphologicalchangesandorientationchangewasobservedbyinvertedmicroscopeand.ThepositiverateofcTnIwasidentifiedby immunofluorescencecytochemistryatthe21thday.Nkx2.5,amyocardialexpressionofgrowth related gene was determined byRT-PCR at the 7thdayaftertheintervention. Gene expression of cTnIwasdeterminedatthe21thdayaftertheintervention.Results:1.Aftertheinterventionofmechani