7 8二羟黄酮对ad小鼠学习记忆和神经病理学的影响 word格式.docxVIP

英汉缩略语名词对照英文缩写AD英文全称Alzheimer’s disease中文全称阿尔兹海默病APSAmmoniumpersulphate过硫酸铵APPamyloid βprecursorproteinsβ 淀粉样蛋白前体AβAmyloid βproteinβ-淀粉样蛋白Aβ 40/42Amyloid βprotein40/42β-淀粉样蛋白40/42BDNFBrain-derived neurotrophic factor脑源性神经营养因子BACE1Beta-site APPcleaving enzyme 1β 位淀粉样前体蛋白裂解酶1BpBase pair碱基对CTFC-terminal fragmentC 段片段DHF7,8-dihydroxyflavone7,8-二羟黄酮ddH2ODMEMDouble distilled waterDulbecco’s Modified Eagle Medium双蒸水改良Eagle培养基DMSODimethyl sulfoximine二甲基亚砜dNTPDeoxynucleoside triphosphate三磷酸脱氧核苷FBSFetal bovine serum胎牛血清HEK293THuman embryonic kidneycell line人胚肾细胞kDaKilodalton千道尔顿mRNAMessenger RNA信使RNAMWMMorris water mazeMorris水迷宫PAGEPolyacrylamide聚丙烯酰胺PBSPhosphate-buffered saline磷酸缓冲盐溶液PBSTPBS with 0.1% Tween-200.1%吐温20-磷酸缓冲盐溶液PCRPolymerase chain reaction多聚酶链反应1英文缩写PVDF英文全称Polyvinylidene difluoride中文全称聚偏二氟乙烯RT-PCRReverse transcription polymerase逆转录多聚酶链反chain reaction应SDSSodium dodecyl sulfate十二烷基磺酸钠SDSSDS-polyacrylamide gel十二烷基硫酸钠聚electrophoresis丙烯酰胺凝胶电泳SH-SY5YHuman neuroblastoma人神经母细胞瘤细胞TEMEDTetramethylethylenediamine四甲基乙二胺TrisTris-hydroxy-methylaminomethane三羟甲基氨基甲烷WBWestern blotting蛋白免疫印记法27,8-二羟黄酮对AD小鼠学习记忆和神经病理学的影响摘要目的最近报道TrkB的激动剂，7,8-二羟黄酮(7,8-dihydroxyflavone，DHF)可以通过提高轴突、肌肉再生和神经递质的传递而对神经兴奋性毒性、中风和帕金森病的动物模型有保护作用。DHF对AD的神经病理学的影响目前还不清楚。本研究通过体内和体外实验证实DHF是否对β 淀粉样蛋白前体（amyloidβprecursorprotein，APP）的切割加工和认知功能有影响。方法将6周龄APP23/PS45转基因小鼠随机分为对照组（Con组）和7,8-二羟黄酮（DHF组）。DHF组给予DHF5mg/Kg腹腔注射，Con 组腹腔注射等容量的17%DMSO的PBS溶液，连续4 周。最后一次药物干预24小时后行Morris水迷宫实验，测定小鼠空间学习与记忆能力。水迷宫实验结束后断头取脑，然后用Westernblotting检测脑内Aβ淀粉样蛋白前体（APP），β 分泌酶（BACE1），β-C末端片段（β-CTF）C99/C89和PS1蛋白的表达水平，ELISA检测脑组织中Aβ40/Aβ42水平，再次使用RT-PCR检测APP/BACE1/PS1的基因mRNA水平的变化。用免疫组化检测AD小鼠脑内老年斑数量。体外实验使用AD的细胞模型20E2和2EB2以及SH-SY5Y 细胞系，使用不同浓度的DHF（0,0.25,0.50,1,5, and 10mΜ）处理24小时后，再用Westernblotting检测20E2,2EB2和SH-SY5Y细胞内Aβ淀粉样蛋白前体（APP），β-C3末端片段（β-CTF）C99/C89蛋白的表达水平，并检测2EB2 的BACE1水平。结果与Con组比较，DHF组小鼠隐蔽平台逃避潜伏期和活动总路径无统计学差异，穿越平台次数无统计学意义（P＞0.05）；DHF组小鼠脑组织内APP,BACE1,β-CTF和PS1 蛋白表达未见明显改变（P＞0.05）同时mRNA,Aβ40/Aβ42水平和老年斑数量均未见明显减少（P＞0.05）。体外实验表明DHF组和Con组相比，APP，BACE1，和CTF水平