表没食子儿茶素没食子酸酯烷基化衍生物合成及抑制肝癌细胞增殖的初步研究-药理学专业论文 word格式.docxVIP

中文摘要目的:以具有抗肿瘤活性的表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)为先导化合物，设计合成乙基化和丙基化程度较高的衍生物。对衍生物抑制肝癌细胞增殖的药理活性进行初步筛选，旨在选出药效较好的衍生物，并进行简单构效分析，为EGCG结构修饰物的抗肿瘤研究提供实验基础。方法:1.以N2为保护气，K2CO3为催化剂，丙酮为反应介质，EGCG分别与(CH3CH2O)2SO2和CH3CH2CH2I进行反应，合成乙基化EGCG和丙基化EGCG产物的粗品。2.采用中压制备液相色谱法分离纯化反应产物。对纯化得到的化合物，通过1H-NMR、13C-NMR、2DNMR、质谱等方法进行结构鉴定；3.用MTT法分别测定乙基化EGCG和丙基化EGCG对肝癌细胞SMMC-7721、HepG2增殖的抑制作用，筛选出有药效的EGCG衍生物。并比较EGCG和有药效的EGCG衍生物对2株肝癌细胞SMMC-7721、HepG2增殖的抑制效果；4.MTT法研究药理活性较强的EGCG衍生物和EGCG分别联合柔红霉素用药，比较两者对肝癌细胞SMMC-7721、HepG2增殖的抑制作用。5.流式细胞仪检测EGCG及药理活性较强的EGCG衍生物增效柔红霉素诱导肝癌细胞凋亡的作用。结果:1.共分离得到8个烷基化程度较高的EGCG衍生物，结构鉴定分别为5,7,3′,4′,5′,3″,4″,5″-八-O-乙基-EGCG（y1）、5,7,3′,4′,3″,4″,5″-七-O-乙基-EGCG（y2）、5,7,4′,5′,3″,4″,5″-七-O-乙基-EGCG（y3）、5,7,3′,4′,3″,4″-六-O-乙基-EGCG（y4）、5,3′,4′,5′,3″,4″,5″-七-O-乙基-EGCG（y5）、5,3′,4′,3″,4″,5″-六-O-乙基-EGCG（y6）、5,7,3′,4′,5′,3″,4″,5″-八-O-丙基-EGCG（b1）、5,7,4′,5′,3″,4″,5″-七-O-丙基-EGCG（b2）；2.乙基化EGCG产物y4、y6对肝癌细胞SMMC-7721、HepG2增殖均有抑制作用，其中y4对肝癌细胞的抑制作用不如EGCG，而y6对肝癌细胞的抑制作用比EGCG明显增强；3.y6联合柔红霉素用药，对肝癌细胞SMMC-7721、HepG2的抑制作用，明显强于EGCG联合柔红霉素用药的效果。结论:乙基化EGCG产物y4、y6对肝癌细胞SMMC-7721、HepG2均有抑制作用，其中y6的抑制作用比EGCG明显增强；对于肝癌细胞SMMC-7721、HepG2，y6对柔红霉素的增敏作用比EGCG明显增强。关键词: EGCG；乙基化EGCG；丙基化EGCG；肝癌细胞Synthesisofepigallocatechingallatealkylated derivatives andpreliminarystudyon theinhibitionofhuman hepatocellularcarcinomacellproliferationAbstractObjective:Tosynthesizehighlyethylatedandpropylatedderivativesofepigallocatechingallate(EGCG)respectivelybasedontheleadcompoundEGCG.Toscreenthepharmacologicalactivityoftheinhibitionofhumanhepatocellularcarcinomacellproliferationandanalysethestructureactivityrelationship,inordertoprovidetheexperimentalbasis forantitumoreffectsofderivativesofEGCG.Methods:1.Withnitrogenprotection,usingK2CO3ascatalyst,acetoneasreactionmedium，EGCGreactswith(CH3CH2O)2SO2 andCH3CH2CH2IrespectivelytoproducecorrespondinglyethylatedEGCGandpropylatedEGCGcrudeproduct.2.Separateandpurifythereactionproductsbyusingmediumpressurepreparativeliquidchromatography.Structuresofthepurifiedcompoundswereidentifiedby1H-NMR,13C-NMR,2DNMRandmassspectrometry.3.The