原创力文档- 1、原创力文档（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。。
- 2、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击 这里二次下载。
- 3、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
- 4、该文档为VIP文档，如果想要下载，成为VIP会员后，下载免费。
- 5、成为VIP后，下载本文档将扣除1次下载权益。下载后，不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
- 6、成为VIP后，您将拥有八大权益，权益包括：VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
- 7、VIP文档为合作方或网友上传，每下载1次， 网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等，对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档
查看更多
aosi蛋白质化学试验原理
蛋白质化学技术原理 沉降系数 沉降系数（sedimentation coefficient，s） 根据1924年Svedberg（离心法创始人--瑞典蛋白质化学家）对沉降系数下的定义：颗粒在单位离心力场中粒子移动的速度。 细胞匀浆差示分离的示意图 等密度梯度离心 等电点聚焦 等电点聚焦就是在电泳槽中放入两性电解质载体，通以直流电时，两性电解质即形成一个由阳极到阴极逐步增加的PH梯度，当蛋白质放进此体系时，不同蛋白质即移动到或聚焦于与其相当的等电点pH位置上。其原理可用图13表示。 等电聚焦 硫酸铵沉淀 分子筛层析（凝胶过滤层析） 基于蛋白质分子的大小与形状分离。大或者 长形的蛋白质不能进入固相基质中的孔道， 直接流出，小或球形蛋白质进入珠子中的小 孔，更缓慢才能流出。 蛋白质的分子筛层析 离子交换色谱 离子交换色谱示例：阴离子交换 亲和层析 利用蛋白质对另外一个分子的特异性结合， 比如酶与底物，受体与配基的特异性结合， 来实现分离。将配基结合在固相基质上，混 合液中的蛋白质将与配基结合。结合的蛋白 质被洗脱下来。通过这种方法可以得到较好 的纯化。 亲和层析示意图 疏水相互作用层析 利用蛋白质的疏水性的大小实现分离。 * /.../ SDS电泳 蛋白质 加SDS 上样 蛋白质根据大小分离 负极 正极 SDS的作用是使所有 氨基酸侧链基团带上 负电荷,结合加热与 还原剂,蛋白质被 线性化 /.../page_protein.html SDS实物展示 负极 正极 浓缩胶 分离胶 小蛋白 大蛋白 当溶液中硫酸铵的浓度增高的时候,蛋白质的溶解度下降，最后沉淀出来。对于每一种蛋白质来说，能使之沉淀的硫酸铵浓度并不一样，利用这一点可以实现蛋白质的粗分离。 /.../BioChem_img039.jpg 大小蛋白质 混合物 分子筛柱 大分子先洗脱出来 小分子后洗脱出来 蛋白质根据所带净电荷实现分离。在阴离子交换色谱中，带正电荷的固相基质与带负电荷的蛋白质结合，而阳离子交换色谱中带负电荷的固相基质与带正电荷的蛋白质结合。通过增大NaCl浓度或者改变pH值，结合在固相基质上的蛋白质得以洗脱。 带阳离子的固相基质 氨基酸混合物 带负电荷的氨基酸 与固相基质结合 吸附 洗脱 洗涤 * * *
文档评论（0）