反液相色谱法测定有机化合物中甲苯的含量.docVIP

反液相色谱法测定有机化合物中甲苯的含量 一、实验目的： 1.了解高效液相色谱仪的基本结构及基本操作2. 了解反相色谱法的基本规律3. 掌握利用内标法进行色谱定量分析的实验方法 二、实验原理： 高效液相色谱仪的基本组成 HPLC的基本组成示意图六通阀示意图高效液相色谱法的特点 μg/mL的标准溶液 ； （2）甲苯标准溶液的制备：准确量取一定量甲苯的标准品，加甲醇溶解后制成19.1μg/mL的标准溶液 ； （3）样品溶液的制备：准确移取适量样品，加甲醇超声溶解，定容于100mL容量瓶中，过滤备用。 3.相对校正因子的测定： 分别取5μL甲苯标准溶液和5μL对氯硝基苯标准溶液，待仪器稳定后，注入溶液，记录色谱图。??????????????????????? f’=AsWi/AiWs 4.样品分析：??? 按照内标物量/样品量=1/2的量配制样品溶液，待仪器稳定后，注入5μL混合溶液，记录色谱图。????????????????????? Wi=f’ Ai’ Ws’/As’ 四、注意事项： 1. 检查流动相是否充足，储液罐要密闭； 2.流动相有气泡要脱气，否则影响灵敏度； 3. 待仪器稳定后，再进样； 4. 进样器要充分洗涤；不可有气泡； 5.实验完成后用100%甲醇冲洗色谱柱。 五、数据处理： 利用公式f’=AsWi/AiWs ，Wi=f’ Ai’ Ws’/As’