专题5 DNA和蛋白质技术精品.pptVIP

三、PCR原理 1.细胞内参与DNA复制的组分与反应条件有哪些？ 2.如何在体外将DNA双螺旋打开呢？ 3. 如何解决DNA聚合酶高温失活的这一新问题？ 4.从何种细菌中能够分离和纯化出耐高温的TagDNA聚合酶？ 四、PCR 的反应过程 1.PCR反应需要哪些条件？ ——一定的缓冲溶液、DNA模板、2种DNA引物、4种脱氧核苷酸、TagDNA聚合酶等。 2.PCR反应所遵循的原理是什么？ ——DNA热变性原理和双链复制原理 体内DNA复制 体外PCR扩增 模板 解链 引物 酶 DNA分子 DNA片段 解旋酶 加热至95℃ RNA引物 DNA引物 解旋酶、DNA聚合酶等 TaqDNA聚合酶 如何提出叶绿体中的色素？ * 专题5《DNA和蛋白质技术》 ——原理?技术?应用 北京理工大学附属中学 苏明学 课题1 DNA的粗提取与鉴定 基本思路： ——根据所提取的生物大分子特定的物理或化学性质，选用一定的物理或化学方法进行分离。 ——DNA的溶解性 ——DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性 具体步骤： ⑴释放DNA ——向鸡血细胞液中加入蒸馏水，并且搅拌过滤 ⑵溶解DNA ——向滤液中加入2mol/L的NaCI溶液，搅拌过滤 ⑶析出DNA ——加蒸馏水降低NaCI溶液的浓度，过滤获粘稠物 ⑷纯化DNA ——DNA粘稠物再溶解，过滤；向滤液中加入预冷的95%酒精 ⑸鉴定DNA 试剂： ——二苯胺 条件： ——沸水浴5min 颜色： ——蓝色 对照： ——空白对照（教材采用） ——标准对照（补充） 课题2 多聚酶链式反应(PCR)扩增DNA片段 一、PCR技术 ——是一种体外迅速扩增DNA片段的技术 二、应用范畴 ——遗传病诊断、刑侦破案、古生物学、基因克隆和DNA序列测定等。 如何提出叶绿体中的色素？ *