4523kj_生物新人教版选修1 5.3《血红蛋白的提取和分离》教材课件ppt.pptVIP

; 本课题学习目标;3、课题重点：凝胶色谱法的原理和方法 4、课题难点： ①样品的处理 ②色谱柱填料的处理和色谱柱的装填。;血液;血红蛋白;1.分离生物大分子的基本思路：;（一） 凝胶色谱法（分配色谱法）;4.凝胶色谱法分离蛋白质的原理和具体过程; （二）缓冲溶液; （三） 电泳：;; 聚丙烯酰胺凝胶电泳; 蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中的迁移率取决 于它所带净电荷的多少以及分子的大小等因素。 （SDS的作用）为了消除净电荷对迁移率的影响， 可以在凝胶中加入SDS。 ;用SDS测定蛋白质分子量的方法; 二、实验操作;(2)血红蛋白的释放：;甲苯层（无色透明）;(4)透 析：;透析过程动画演示;2.凝胶色谱操作:;（2）凝胶色谱柱的装填; ;（3）样品加入与洗脱;（3）样品加入与洗脱;思考下面的问题：; 血红蛋白提取和分离的程序可分为四大步，包括：样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定。首先通过洗涤红细胞、血红蛋白的释放、离心等操作收集到血红蛋白溶液，即:样品的处理；再经过透析去除分子量较小的杂质，即样品的粗分离；然后通过凝胶色谱法将相对分子质量较大的杂质蛋白除去，即:样品的纯化；最后经聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定。;（三）SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳（选做）; 观察