微生物的遗传与育种教程.pptVIP

转化（transformation） 转化或转化作用：受体菌（recipient或receptor）直接吸收了来自供体菌（donor）的DNA片段，通过交换整合到自己的基因组中，从而获得部分新的遗传型状的现象。接受了供体菌DNA的受体菌称为转化子（transformant）。 范围：原核生物中，转化是一个较普遍的现象。 若干放线菌和蓝细菌及少数真核微生物也有转化报道。 转化发生的条件 两个菌种或菌株之间能否发生转化，与它们在进化过程中的亲缘关系有着密切的关系。但即使在转化率极高的那些种中，其不同菌株间也不一定都可发生转化。 进行转化的受体细胞必须处于感受态（competence），亦即受体细胞最易接受外源DNA片段并实现其转化的一种生理状态。也可以采用人工的方法使细菌转变成感受态 感受态因子：一种细胞外蛋白，可与受体菌细胞表面的特异受体结合，结果激活细胞内一系列与转化有关的基因的表达，其中产生的自溶素使细胞表面的DNA结合蛋白和核酸酶裸露出来，以完成转化过程。不同细菌，每个细胞上的DNA结合位点数不同。 转化因子的本质一般是DNA，经多次提纯操作后，每一转化DNA片段的分子量都小于1×107，约占细菌核染色体组的0.3%。据研究，呈质粒形式的转化因子，其转化频率最高；一般的转化因子都是线状双链DNA；也有线状单链DNA具有转化作用的报道。 转化过程：以S. Pneumonia为例分为六阶段： 双链DNA片段与感受态受体菌细胞表面的 DNA结合位点（主要在新形成细胞壁的赤道区）结合； 在吸附位点上的DNA被核酸内切酶分解，形成平均分子量为4~5×106的DNA片段； DNA双链中的一条单链被膜上的另一种核酸酶切除，另一条单链逐步进入细胞，这是一个耗能的过程。分子量小于5×105的DNA片段不能进入细胞。 来自供体菌的单链DNA片段在细胞内与受体细胞核染色体组上的同源区配对交换，形成了一个杂合DNA区段（heterozygous region）。在这一过程中，有核酸酶、DNA聚合酶和DNA连接酶的参与； 受体菌的染色体组进行复制，杂合区段分离成两个，其中之一获得了供体菌的转化基因，另一个未获供体基因； 当细胞发生分裂后，一个子细胞含供体基因，这就是转化子；另一个细胞与原始受体菌一样。 转染（transfection）：把噬菌体或其它病毒的DNA（或RNA）抽提出来，让它去感染感受态的宿主细胞，并进而产生正常的噬菌体或病毒的后代，这种现象称为转染（transfection）。它与转化不同之处是病毒或噬菌体并非遗传基因的供体菌，中间也不发生任何遗传因子的交换或整合，最后也不产生具有杂种性质的转化子。 转导(transduction) 转导：通过完全缺陷或部分缺陷噬菌体的媒介，把供体细胞的DNA小片段携带到受体细胞中，通过交换与整合，使后者获得前者部分遗传形状的现象。获得新遗传形状的受体细胞称为转导子（transductant） 转导的方式： 普遍转导 转导 局限转导 普遍转导（generalized transduction） 通过完全完全缺陷噬菌体对供体菌任何小片段的误包而实现其遗传性状传递到受体菌的转导现象 普遍转导（complete transduction） P22 噬菌体引起的 S.typhimurum的普遍转导过程 局限转导（specializd transduction） 概念：通过部分缺陷的温和噬菌体把供体菌的少数特定基因携带到受体菌中，并获得表达的转导现象。 特点：仅转导供体菌的个别基因（一般为噬菌体整合位点两侧的基因）；特定的基因由部分缺陷噬菌体携带；缺陷噬菌体是由于其在形成过程中所发生的低频率误切（误切的频率一般在10-5左右，如E.coli 噬菌体引起的半乳糖利用、产生物素基因的转导）而形成。 接合（conjugation） 概念：供体菌通过性菌毛传递不同长度的单链DNA给受体菌，在后者细胞中发生交换、整合，从而使后者获得供体菌的遗传性状的现象。获得新性状的受体细胞称为接合子。 存在范围：细菌和放线菌中都存在接合现象