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四. 细菌基因转移和基因重组 重要概念 转化、接合、转导、 F’因子、普遍性转导、转导噬菌体、局限性转导、共转导 知识点 （1）F因子的三种存在状态（E.coli为例）* （2）DNA杂交重组中的双交换与单交换 （3）中断杂交试验*：结果分析 （4）F’因子的形成及其突出特点。 F因子的三种状态（以大肠杆菌为例）： 没有F因子，即F-； 一个自主状态F因子，即F+； 一个整合到自己染色体内的F因子，即Hfr菌株。 单交换产生不平衡的线性染色体 双交产生稳定的重组子 b. 基因转移的顺序——非随机 a. 以基因出现的时间为标准作E. coli的遗传连锁图。 共 转 导 指两个基因同在一起进行转导。可应用于测定细菌基因间的连锁关系。 例：a 基因和 b 基因的共转导频率很高、和 c 基因的共转导频率也很高；而 b 和 c 基因很少或完全不共转导。那么，这三个基因的相对位置应为： b - a - c。 五. 质 粒 重要概念 质粒、质粒的不相容性、自主转移质粒、可移动 质粒 知识点 （1）质粒的分子结构（通常）：CCC dsDNA （2）质粒的一般特性 （3）质粒编码基因的特性：非必需、特殊条件下… （4）质粒编码的典型遗传表型* （5）细胞分裂中的质粒分配* ：质粒稳定遗传的两个条件、主动分配体系的par区结构、不含质粒的子代细胞的宿主致死体系（原理、运作） （6）质粒的各种分类：按复制控制形式分（严紧型 松弛型）、按宿主范围分（窄宿主范围 广宿主范围）、按转移能力分（转移性 非转移性） （7）质粒复制的调控：负调控，两种类型（抑制物-靶位调控、重复子-竞争结合调控） （8）质粒作为基因工程载体的突出特点 质粒的一般特性 能自我复制，并稳定遗传 在细胞内的大小和数量不相同 非必要遗传物质 互不相容性 可消除性 具有可转移性及稳定性 可整合性 可重组性 耐碱性 质粒编码的典型遗传表型 多数质粒均控制宿主细胞一种or几种特殊性状，即具有一定的表型。依表型不同，质粒主要分为如下几类： 致育质粒（Fertility factor） 抗性质粒（Resistance factor） 细菌素质粒（Bacteriocin production plasmid） 毒性质粒（virulence plasmid） 降解质粒（Metabolic plasmid） 致病性质粒 宿主致死体系 质粒编码致死基因ccdA(解毒剂)和ccdB(毒剂)； 无质粒子细胞：开始时含有CcdA和CcdB，随后这两种蛋白质逐渐消失； 但毒剂CcdB比解毒剂CcdA稳定，CcdA易先被蛋白酶降解，于是CcdB蛋白行使其对宿主细胞的致死作用。 质粒复制的调控 抑制物-靶位调控：依赖一小段反向转录的RNA作为抑制物，通过它与目标RNA的互补结合以阻止质粒复制的起始。目标RNA包括质粒DNA复制的引物、用于编码复制所需的Rep蛋白的mRNA。 重复子-竞争结合调控：质粒在复制起始位点(ori)和复制基因(rep)附近存在着多个重复子序列，它们能与复制起始必需的Rep蛋白竞争性结合，从而抑制质粒的复制和拷贝数增加。 ①转录自体调控 ②偶联模型 七. 酵母菌遗传分析 知识点 （1）酵母菌基本特性：菌落、代谢型、繁殖… （2）真核生物染色体的三大功能序列（实现染色体功能的三大基本要素）：基本结构 （3）嗜杀现象与嗜杀质粒* （4）单倍体酵母细胞的接合：简要过程 （5）接合型转换的单向性 （6）酵母菌的载体系统（功能分类及各自主要功能）。 嗜杀现象 酿酒酵母中的某些菌株可以产生毒素杀死其他酵母，这种现象即称为嗜杀现象。产生毒素的酵母菌株称嗜杀株，对毒素敏感的菌株称为敏感株，既不产毒素又不对毒素敏感的菌株称为中性株。嗜杀株对毒素有免疫性，敏感株不产生毒素。 一般嗜杀现象是由两种具有自我复制能力的细胞遗传因子——线状dsRNA决定的，它们通常以蛋白外壳包裹的粒子状态存在于细胞质中，但与病毒粒子不同不具有体外侵染特性，故称为嗜杀质粒。但因为它们具有蛋白外壳，因此又称为类病毒颗粒。 嗜杀质粒分为L-型和M-型（编码毒素蛋白分泌到胞外）。不同嗜杀酵母株有不同的M型类病毒，从而编码合成不同的毒素蛋白，表现不同嗜杀表型。 只有L型类病毒而无M型类病毒的酵母菌株，不具备嗜杀性，是敏感株；只有同时具备L型类病毒和M型类病毒，酵母才具有嗜杀性。故有人称M型类病毒为嗜杀质粒、L型类病毒为辅助颗粒。 这两种质粒遗传因子不具有细胞外感染能力，但它们可以通过酵母的高频率接合而在酵母中广泛传播。 两个单倍体酵母细胞的接合 接合是由一种接合类型细胞分泌的信息素与另一种接合类型细胞携带的受体相互作用而介导的。 a细胞和α细胞的接合通过各自分泌的可扩散a-因