王旭西安分析方法验证文字稿.ppt

中药分析方法验证的内容和要求 国家药典委员会 王旭 中药分析方法验证的特殊性 与国际协调方法接轨（ICH） 中药方法学验证的特点 分析方法的建立与分析方法验证 中药提取纯化技术要求 提取方法 提取条件 提取方式 分离纯化 液-液萃取法 固液萃取法 沉淀法 中药分析方法验证实验项目 验证的目的 证明采用的方法是否适合于相应的检测方法 新建立的检测方法、改变原检测方法、工艺变更、处方变更等均须验证 验证过程和结果均应记载在标准起草或修订说明中 需验证的分析方法类型 鉴别 限量检查 含量测定 溶出度、释放度 需控制的残留物、添加物等 准确度(Accuracy) 可用已知纯度的对照品做加样回收测定，即于已知被测成分含量的供试品中再精密加入一定量的已知纯度的被测成分对照品，依法测定。用实测值与供试品中含有量之差，除以加入对照品量计算回收率。 准确度(Accuracy) 在加样回收试验中须注意对照品的加入量与供试品中被测成分含有量之和必须在标准曲线线性范围之内；加入的对照品的量要适当，过小则引起较大的相对误差，过大则干扰成分相对减少，真实性差 回收率%=（C-A）/B×100% 式中 A为供试品所含被测成分量； B为加入对照品量； C为实测值。 准确度(Accuracy) 数据要求 在规定范围内，取同一浓度的供试品，用6个测定结果进行评价；或设计3个不同浓度，每个浓度各分别制备3份供试品溶液进行测定，用9个测定结果进行评价，一般中间浓度加入量与所取供试品含量之比控制在1:1左右。 准确度(Accuracy) 准确度(Accuracy) ? 精密度（Precision） 重复性(Repeatability) 重复性(Repeatability) 中间精密度(Intermediate precision) 中间精密度(Intermediate precision) 实验方法 结果判定 重现性(Reproducibility) ? 专属性（Specificity ） 专属性（Specificity） 专属性有以下含义： 鉴别：确证被测物是否符合其特性。 检查：确保采用的分析方法可检出被测物中杂质或应控制物的准确含量，如有关物质、有毒成分、重金属、溶剂残留量等。 含量测定：提供样品中被测物含量的准确结果。 专属性（Specificity） 鉴别 应能与可能共存的物质或结构相似化合物区分。不含被测成分的供试品，以及结构相似或组分中的有关化合物，均不得干扰测定 显微鉴别、色谱光谱鉴别等应附相应的代表性图象或图谱。 专属性（Specificity） 含量测定和限量检查 以不含被测成分的供试品（除去含待测成分药材或不含待测成分的模拟复方）试验说明方法的专属性。并标明相关成分在图中的位置，色谱法中的分离度应符合要求。必要时可采用二极管阵列检测或质谱检测进行验证 专属性（Specificity） 试验方法： 阴性干扰试验 色谱纯度试验 易混淆试验 结果判定 检测限（Limit of Detection，LOD) 检测限（Limit of Detection，LOD) 实验方法 目测法 理化反应 薄层色谱法 信噪比法 偏差计算法 定量限（Limit of Quantitative, LOQ） 定量限（Limit of Quantitative, LOQ） 实验方法 目测法 理化反应 薄层色谱法 信噪比法 偏差计算法 线性（Linearity） 线性（Linearity） 应在方法允许的尽可能宽的范围内测定线性关系。可用一贮备液经精密稀释，或分别精密称样，制备一系列供试品的方法进行测定，至少制备5个浓度的供试品，其最低浓度可约为定量限浓度。以测得的响应信号作为被测物浓度的函数作图，观察是否呈线性，再用最小二乘法进行线性回归。如响应信号与浓度不呈线性关系，必要时可经数学转换，再进行线性回归计算。 数据要求：应列出回归方程、相关系数和线性图。 线性（Linearity） 实验方法 测定浓度的基本要求 配制方式 结果判定 范围（Range） 范围（Range） 范围（中药和复方制剂） ? 耐用性（Robustness） 耐用性（Robustness） 耐用性（Robustness） 被测溶液的稳定性 实验操作和考察项目 液相色谱和气相色谱 薄层色谱 结果判定 耐用性（Robustness）