选修三基因工程的最基本操作工具ppt.ppt

作为载体的必要条件 1.能自我复制 能进入受体生物细胞并在受体生物细胞内复制并表达； 2.有一个至多个限制酶切位点 能与目的基因结合 3.有遗传标记基因 便于观察 4.对受体细胞无害、易分离 安全、比较容易得到 议一议 2、能否用SARS病毒作为基因载体？ 3、作为载体，若没有切割位点将怎样？ 4、携带目的基因的载体是否进入了受体细胞，如何鉴定？ 5、假如目的基因导入受体细胞后不能复制，将怎样？ 1、从化学组成来看，载体应含有什么成分？ 双链DNA 不能 不能进行DNA的重组 载体上应有标记基因 可能造成基因丢失 转入了鱼抗冻基因的番茄 转入了海蜇绿色荧光蛋白基因的荧光鼠 胰岛素的大规模生产 转基因抗虫棉 抗虫棉 普通棉 本节聚焦 1、基因工程的概念； 2、DNA重组技术的基本工具； 3、重组DNA分子的模拟操作； 基因工程又叫做 或 。通俗地说，就是按照人们的意愿，把一种生物的某种 提取出来，加 以 ，然后放到另一种生物的细胞里， 改造生物的________。 基因拼接技术 DNA重组技术 基因 修饰改造 定向地 遗传性状 知识一：基因工程的概念 基因工程又叫做基因拼接技术或DNA重组技术。通俗地说，就是按照人们的意愿，把一种生物的某种基因提取出来，加以修饰改造，然后放到另一种生物的细胞里，定向地改造生物的遗传性状。 基因工程的别名 操作环境 操作对象 操作水平 基本过程 实质 结果 基因拼接技术或DNA重组技术 生物体外 基因 DNA分子水平 人类需要的基因产物 剪切 → 拼接 → 导入 → 表达 基因重组 基因工程的概念 1、基因工程培育抗虫棉的关键步骤是什么？ 关键步骤一： 抗虫基因从苏云金芽孢杆菌细胞内提取出来 关键步骤二： 抗虫基因与运载体DNA连接 关键步骤三： 重组DNA导入受体(棉花)细胞 2、解决培育抗虫棉的关键步骤需要哪些工具？ 关键步骤一的工具：基因的剪刀——限制酶 关键步骤二的工具：基因的针线——DNA连接酶 关键步骤三的工具：基因的运载工具——运载体 （1）识别双链DNA分子的___________________ 主要是从_________中分离纯化出来的一种酶。 4000种。 1、来源： 2、种类： 3、作用： 4、结果： 形成两种末端 一、 “分子手术刀” ——限制性核酸内切酶 ________ ________ （2）使每一条链中_________的两个核苷酸之间 的断开_____________ 原核生物 粘性末端 平末端 特定部位 某种特定的核苷酸序列 磷酸二酯键 什么叫黏性末端？ 当限制酶从识别序列的____________ ______，被限制酶切开的DNA两条单链的切口，带有几个______________，他们之间正好________，这样的切口叫黏性末端。 伸出的核苷酸 互补配对 中心轴线两侧 切开时 什么叫平末端？ 当限制酶从识别序列的_________ ______，切开的DNA两条单链的切口，是______，这样的切口叫平末端。 平整的 中心轴线处 切开时 限制性内切酶作用过程 点击播放 A T G C A T G C 磷酸二酯键 思考 1、限制酶在原核生物中的作用是什么？ 2、限制酶为什么不会使自身的DNA被切断？ 限制酶切割外源DNA,使之失效，从而达到保护自身的目的！ 含有某种限制酶的细胞，其DNA分子中或者不具备这种 限制酶的识别切割序列，或者通过甲基化酶将甲基转移到 所识别序列的碱基上，使限制酶不能将其切开。 迄今为止，基因工程中使用的限制酶绝大部分都是从细菌或霉菌中提取出来的，它们各自可以识别和切断DNA上特定的碱基序列。细菌中限制酶之所以不切断自身DNA，是因为微生物在长期的进化过程中形成了一套完善的防御机制，对于外源入侵的DNA可以降解掉。生物在长期演化过程中，含有某种限制酶的细胞，其DNA分子中或者不具备这种限制酶的识别切割序列，或者通过甲基化酶将甲基转移到所识别序列的碱基上，使限制酶不能将其切开。这样，尽管细菌中含有某种限制酶也不会使自身的DNA被切断，并且可以防止外源DNA的入侵 大肠杆菌(E.coli)的一种限制酶EcoRI能识别GAATTC序列，并在G和A之间切开。 什么叫做黏性末端? 什么叫黏性末端？ 被限制酶切开的DNA两条单链的切口，带有几个伸出的核苷酸，他们之间正好互补配对，这样的切口叫黏性末端。 什么叫平末端？ 当限制酶从