蛋白质合成讲义.pptVIP

蛋白质合成;核糖体由大亚基和小亚基组成。;细菌核糖体及其亚基的电镜图片;核糖体的体积足够大，能够结合mRNA和tRNA;核糖体具有两个位点以结合负载tRNA;氨基酰-tRNA 进入 A位， 接受来自肽酰 –tRNA的多肽链，并转位至 P 位以进行肽链延长的下一次循环。;tRNA 和 mRNA 沿相同的方向通过核糖体。;蛋白质合成分为三个阶段;核糖体靠其亚基结合于 mRNA, 将核酸三联体密码翻译为蛋白质， 然后从 mRNA上解离。;启动因子 (原核细胞IF, 真核细胞eIF) 是在蛋白质合成的启动阶段与核糖体小亚基结合的蛋白质。;启动需要游离的核糖体亚基（终止阶段时产生）。 启动因子只结合于 30S 小亚基上。 当大小两个亚基重新结合时，启动因子就会解离下来。;mRNA上的核糖体结合位点可被起始复合物保护。;启动因子可稳定游离的 30S 小亚基，并使起始 tRNA 结合于 30S-mRNA 复合物。;启动需要携带 IF-3 的30S小亚基。;蛋白质的合成通常需要特殊的三联体密码（ AUG）。;起始 N-甲酰-蛋氨酸-tRNA (fMet-tRNAf) 是以甲酰-四氢叶酸还原酶作为辅因子，由蛋氨酸-tRNA的甲酰化形成的。;只有 fMet-tRNAf 与 30S 小亚基一起用于启动， 只有其他的 氨基酰-tRNAs (aa-tRNA) 与 70S 核糖体用于延长。;fMet-tRNAf 与起始 tRNA有明显的区别。;fMet-tRNAf 与 30S-mRNA 复合物结合需要IF-2。 与50S亚基 结合后， 全部 IF 因子均解离下来， GTP 转变为GDP。;细菌中新合成的蛋白质的起始氨基酸是 甲酰-蛋氨酸, 但在蛋白质合成期间，甲酰基，有时是蛋氨酸要被去除。;6.5 启动涉及 mRNA 与 rRNA的碱基配对;多聚核糖体;在真核生物中，起始复合物与伸展mRNA的结合需要启动因子，且支持大亚基的加入。;真核生物中，核糖体从mRNA的 5’端 移至核糖体结合位点（含AUG 起始密码）。;6.7 真核细胞采用多种起始因子的复合物;在真核生物启动中， eIF-2 与 Met-tRNAf形成三元复合物。三元复合物与游离的40S 亚基结合后与 mRNA的 5’端结合。 在反应中, 当eIF-2 以 eIF2-GDP 的形式被释放出来时，GTP 被水解。 eIF-2B 重新成为有活性的形式。;6.7 真核细胞采用多种起始因子的复合物;延长因子 (原核细胞 EF,真核细胞eEF) 是与核糖体循环有关, ??氨基酸加到多肽链上的蛋白质。;EF-Tu-GTP 将 氨酰-tRNA 置于核糖体上， 然后以 EF-Tu-GDP的形式被释放出来。 EF-Ts 在GTP 替换GDP的过程中发挥介导作用。此反应消耗 GTP， 释放 GDP。 唯一不能被 EF-Tu-GTP识别的氨酰-tRNA 就是 fMet-tRNAf, 这样就阻止了EF-Tu-GTP 与 AUG 或 GUG 密码的结合。;EF-Tu and EF-G的结合使 核糖体接受新的 氨酰-tRNA, 形成肽键, 并转位。（黄色霉素、夫西地酸）;核糖体50S 亚基具有转肽酶的活性，使新加入的氨基酸与延伸的肽链间以肽键相连。 rRNA具有真正的催化活性 。;肽键形成的反应发生于P 位上肽酰-tRNA的多肽 与 A 位上氨酰-tRNA 氨基酸之间。;嘌呤霉素与糖基的一部分相联系的芳香族氨基酸很相象 。;转位包括两个阶段。首先， 一旦肽键形成， A 位上tRNA 的氨基端转至 P 位。然后， tRNA 的反密码环也转至 P 位。;6.9 转位使核糖体前移;转位发生时，EF-G 经历了较大的方向改变。;终止密码 (UAG, UAA, UGA);Molecular mimicry enables the elongation factor Tu-tRNA complex, the translocation factor EF-G, and the release factors RF1/2-RF3 to bind to the same ribosomal site.;Figure 6.28 The RF (release factor) terminates protein synthesis by releasing the protein chain. The RRF (ribosome recycling factor) releases the last tRNA, and EF-G releases RRF, causing the ribosome to dissocuate.;30S 核糖体亚基是核酸蛋白质。 黄色为蛋白质。