溶菌酶的活性检测方法.pdfVIP

中国农学通报 2012,28(12):93-98 Chinese Agricultural Science Bulletin 溶菌酶的活性检测方法 1 2 宋美娜 ，仝其根 1 （农产品有害微生物及农残安全检测与控制北京市重点实验室，北京102206 2 北京农学院食品科学与工程学院，北京102206） 摘 要：为解决现行溶壁微球菌（比浊）法测定溶菌酶活性方法中存在的测定条件不统一、重复性不高等 问题。对该方法中4 个主要影响因素——溶菌酶活性范围、底物悬浮液吸光度值范围、检测温度和菌体 制备方法进行了研究，以得到最佳的检测条件及菌体制备方法。结果表明：（1）溶菌酶活性75~250 U/mL 之间，底物悬浮液吸光度值0.45~0.77 (OD )之间，酶活力曲线具有良好的线性关系，与国家药典中基本 450 一致；（2 ）检测温度25~50℃之间，底物悬浮液的吸光度变化值△OD 随温度升高而增大，适当提高检测 450 温度可提高检测的精度，有待进一步研究；（3）用于大规模样品检测时，冷冻菌体法为制备底物悬浮液的 最佳方法，检测具有良好的线性关系、管间重复性及储存稳定性。 关键词：溶菌酶；活性；底物悬浮液；温度；检测方法 中图分类号：TS201.2 文献标志码：A 论文编号：2011-3605 DetectionMethodofLysozymeActivity 1 2 Song Meina , Tong Qigen 1 ( BeijingKeyLaboratoryofAgriculturalProductDetectionandControlofSpoilageOrganismsandPesticideResidue, Beijing 102206; 2FacultyofFoodScienceandEngineeringBeijingUniversityofAgriculture,Beijing 102206) Abstract: To address the current problems of Micrococcus Lysodeikticus Fleming (turbidity) method for the determination of lysozyme activity，such as not unified measurement conditions, poor repeatability, four main influence factors had been studied which were respectively the range of lysozyme activity, substrate suspension absorbance va