一种新的蘑菇凝集素的生化特征和氨基酸分析.pdfVIP

氨基酸和生物资源 ·28 · Amino Acids Biotic Resources 2002 ,24 (3) :28～30 一种新的蘑菇凝集素的生化特征和氨基酸分析 彭进洪 ,孙 　慧 ,赵辰光 (武汉大学生命科学学院 ,武汉 430072) ( ) 摘要 :用 NH SO 分级沉淀、离子交换和分子筛等方法 ,从食用蘑菇中分离纯化出一种凝集素 ,经 SDS - PAGE 测定其亚 4 2 4 基的相对分子量为 15. 8kDa ,质谱分析法测定其分子量为 32kDa ,说明该凝集素由两个亚基组成。氨基酸分析发现 ,该凝集素 不含半胱氨酸。热稳定试验和耐酸碱试验显示 ,该凝集素活性具很高稳定性。 关键词 :蘑菇凝集素 ;血凝集活性 ;生化特征 中国分类号:R977. 4 　　　　　　　文献标识码 :A 　　　　　　　文章编号 :1006 - 8376 - (2002) 03 - 0028 - 03 [1 ] [2 ][3 ] [4 ] 　　多种大型真菌如金针菇 、灵芝 、口蘑 在 磷酸缓冲液中透析脱盐 , 再转入 DEAE - Sepharose ( ) 我国不仅早已成为食补佳品 ,在中药学中亦长期被 柱 1. 6cm ×10cm 洗涤 ,NaCl 梯度洗脱 ,得吸收峰 1 归列为重要药材。越来越多的研究显示凝集素是各 和吸收峰 2 ; 取峰 2 磷酸缓冲液透析脱盐 , 再用 ( ) ( ) 种蘑菇的重要药理成分。Pemberton 1994 证明 ,在 Sephacry1 S - 200 柱 1. 6 cm ×80 cm 沉析 ,得 1 个主 他研究的 400 余种大型真菌中 ,50 %具有很强的凝 洗脱峰 ,冻干后即得蘑菇凝集素。 集素活性[5 ] ,而全球仅有约 50 种药用真菌凝集素被 1. 3 　分子量测定 纯化[6 ] ,说明在大型真菌 ———这座凝集素的药物宝 SDS - PAGE 参照 laemmli 方法[8 ] 进行 , 分离胶 库 ,还有待于深入研究 ,其开发工作还刚刚起步。 浓度为 14 % ,浓缩胶浓度为 5 % 。考马斯亮蓝 R - 凝集素是一类可以和特定结构的糖分子特异结 250 染色。 合的蛋白质[7 ] ,大型真菌凝集素的抗肿瘤活性、免疫 以质谱法测定分子量, 由东北制药总厂研究院 调节活性及机理已得到深入研究[6 ] 。纯化药用真菌 进行。 凝集素 ,研究其生化特征 ,对明确药用真菌有效成份 1. 4 　氨基酸组成分析 和中药科学配方具有重要意义。 委托中国科学院上海生化研究所采用 HCl 水 本文报道了一种新的蘑菇凝集素 ,分析了它的 解 ,于氨基酸自动分析仪上测定凝集素的氨基酸组 生化特征和凝集素活性。 成。