15.遗传病的治疗2013(中医)推荐.pptVIP

病毒载体：将RNA和DNA病毒去除致病性基因，同时具有携带目的基因特性的人工改造病毒。 病毒载体 间接体内疗法 种类： （1）反转录病毒载体 （2）腺 病 毒 （3）腺病毒相关病毒（腺伴随病毒） * 病毒载体：将RNA和DNA病毒去除致病性基因，同时具有携带目的基因特性的人工改造病毒。 病毒载体 间接体内疗法 优点： 转染效率高 缺点： 存在疫原性、细胞毒作用、携带外源基因的大小受限、病毒滴度不易提高。 * 非病毒载体 间接体内疗法 缺点： 转染效率较低 优点： 安全、制备简单和携带外源基因较大。 种类： （1）脂质体 （2）真核细胞表达质粒载体 （3）非生物性聚合载体 （4）人工染色体 * 间接体内疗法 1、克隆正常基因 2、靶细胞的选择 3、目的基因的转移 4、基因转染细胞的筛选 5、基因转染细胞的鉴定 6、回输体内 * 四、基因治疗的临床运用 1.腺苷脱氨酶缺乏严重联合免疫缺陷病（adenosine deaminase-deficient severe combined immunodeficiency ， ADA-SCID） * 重症联合免疫缺陷（Severe combined immunodeficiency disease，简称SCID），患者缺乏正常人体免疫功能，其染色体上编码腺苷脱氨酶（简称ADA）的基因发生突变所致。由于ADA是嘌呤代谢中的一种酶，该基因缺陷将导致患者身体细胞中脱氧腺苷的累积，达到高浓度时脱氧腺苷将对免疫系统细胞（如T-细胞和B-细胞）产生毒性。 Ashanti DiSilva, the first person to be treated by gene therapy. * 将正常ADA基因与反转录病毒载体相连，构建重组病毒表达载体。 从患体体内分离有免疫缺陷的T淋巴细胞。 用重组病毒感染体外培养的T淋巴细胞，使正常ADA基因插入到T淋巴细胞基因组中。 培养细胞并确认该基因正常表达。 将含有正常基因的T淋巴细胞回输到患者的骨髓组织中。经5-6个月治疗，患者体内T淋巴细胞的数量恢复到正常水平，体内ADA酶几乎达到正常水平，免疫功能得到恢复。 1990年，美国第一次对SCID病人作基因治疗，其步骤为： * 四、基因治疗的临床运用 2、血友病B 血浆中缺乏凝血Ⅸ因子所致 我国人体基因治疗第一成功的个例子。 1991,薛京伦 (复旦大学) 携带人FⅨ因子cDNA 的逆转录病毒载体(HBSF - FⅨ) 皮肤成纤维细胞 Factor IX: 5% * 细胞因子 1984～1987年，淋巴激活的杀伤细胞(LAK) 3、肿瘤的基因治疗 1986年，肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)结合IL-2 1991年，肿瘤坏死因子(TNF)治疗黑色素瘤 四、基因治疗的临床运用 * 细胞因子 肿瘤的基因治疗 四、基因治疗的临床运用 1992年，单纯庖疹病毒（HSV）-胸腺嘧啶激酶（TK） 和 GCV（Ganciclovir药物） “自杀基因” * 细胞因子 肿瘤的基因治疗 四、基因治疗的临床运用 “自杀基因” 肿瘤抑制基因 pRB, p53, p16, p21, p27 * 细胞因子 肿瘤的基因治疗 四、基因治疗的临床运用 “自杀基因” 肿瘤抑制基因 应用纳米颗粒传递基因阻断肿瘤新生血管生成 2002年，美国Hood等人应用阳离子纳米颗粒转导目的基因，阻断肿瘤组织新生血管生成。 * 1 2 3 存在的问题 导入基 因的持 续表达 导入基 因的高 效表达 安全性 问题 * 小 结 掌握： 基因治疗的定义、策略和途径 基因治疗的基本方法： 克隆正常基因方法、基因转移方法和载体、靶细胞选择。 药物治疗和饮食治疗的基本原则 了解： 目前基因治疗存在的问题 * 复习思考题 1、传统的遗传病治疗包括哪几个方面，各有什么优缺点？ 2、何谓基因治疗？目的基因转移有哪几种方法？各有何优缺点？ 3、反转录病毒和腺病毒作为基因治疗的载体各有何优缺点？ * 唇 裂 手术前 手术后 * 多 指 并指合并多指 * 基因修正（gene correction）： 指通过特定方法，将致病基因的突变碱基序列纠正,对突变DNA进行原位修复。 操作困难。 * 基因置换：在原位定点导入外源正常基因，代替突变基因的直接疗法。 目的：纠正突变基因，进行精确的原位修复而不涉及基因组其他任何的改变。 是理想的基因治疗策略，已用于的动物实验，但尚未应用于临床，基因治疗的远期目标。 * 基因增补（基因添加）：非定点导入外源正常基因，而没有真正去除或修复突变基因。 外源正常基因导入体内后，可代替突变基因表达具有正常功能的蛋白而发挥治疗作用，属于间接治疗。 增：向靶细胞中导入其原本不表达的基因； 补：导入突变基因的正常基