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抗副溶血弧菌IgY的提纯及检测副溶血弧菌的-华南农业大学学报
第29 卷第4 期 华南农业大学学报 Vol. 29 , No.4
2008 年 10 月 Joumal of South China Agricultural University Oct. 2008
抗副溶血弧菌 IgY 的提纯及检测副溶血弧菌的
间接 ELISA 的建立
何彬斌钟青萍王 斌2
(1广东省高等学校食品质量安全重点开放实验室，华南农业大学食品质量安全研究所，广东广州 510642;
2 广州市华南农大生物药品有限公司，广东广州 510642)
摘要:分离纯化抗副溶血弧菌 IgY ，并建立一种快速检测副溶血弧菌的间接酶联免疫吸附法(indirect ELISA) ，分析
了该方法的敏感性、特异性和重复性.将水稀释法、乙醇沉淀法和 DEAE-Sepharose FF 离子交换层析联用以分离纯
化抗副溶血弧菌IgY ，然后以纯化的 IgY 为一抗，辣根过氧化物酶标兔抗鸡 IgY 为二抗，建立检测副溶血弧菌的间
接 ELISA 方法.结果表明:建立的间接 ELISA 方法，一抗的最佳工作质量浓度为 15μ吕/mL，二抗的最佳稀释度为
5
1: 10 000 ，副溶血弧菌培养液的检出限为1.0 X 10 cfu/mL，该方法对测定的其他8 种菌株没有交叉反应.建立的间
接 ELISA 方法具有良好的灵敏度、特异性和稳定性，能够快速、准确地对副溶血弧菌进行检测.
关键词:鸡卵黄免疫球蛋白;间接ELISA; 副溶血弧菌;检测
文章编号:1001-411X(200的04-0095-05
中图分类号:15207.4 文献标识码:A
Purification of Anti- Vibrio parahaemololyticus IgY and Establishment of
Indirect ELISA for Detecting Vibrio parahaemololyticus
1 1 2
HE Bin-bin , ZHONG Qing-ping , WANG Bin
(1 The Higher Education Key Lab of Guangdong Province Food Quality and Safety ,
Institute of Food Quality and Safety ,South China Agricultural University , Guangzhou 510642 , China;
2 Guangzhou South China Biological Medicine Co. Ltd , Guangzhou 510642 , China)
Abstract :The objectives of the present study were to establish an indirect ELISA for the detection of Vib-
rio parahaemololytic山， and analyse the specificity , sensitivity and r
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