microbe-1 实验室环境和人体表面微生物检查 .pptVIP

未洗的手 * * * 实验一 实验室环境和人体表面微生物的检查 一、目的要求 　　1．证明实验室环境与体表存在微生物； 　　2．比较来自不同场所与不同条件下细菌的数量和类型； 　　3．体会无菌操作的重要性。 二、基本原理 　　平板培养基含有细菌生长所需要的营养成分，当取自不同来源的样品接种于培养基上，在37℃温度下培养，1～2天内每一菌体即能通过很多次细胞分裂而进行繁殖，形成一个可见的细胞群体的集落，称为菌落（colony）。每一种细菌所形成的菌落都有它自己的特点，因此，可通过平板培养来检查环境中细菌的数量和类型。 三、器材 　　肉膏蛋白胨琼脂平板，无菌水，灭菌棉签（装在试管内），接种环，试管架，酒精灯，记号笔，标签纸，废物缸。 四、操作步骤 　　每组在“实验室”和“人体”两大部分中各选择一个内容做实验，结果供全班讨论。 1．写标签 　　根据实验要求，每组准备4只培养皿，按课本P6要求写好标签和做好记号。 2．实验室微生物的检查 　　（1）空气 将一个肉膏蛋白胨琼脂平板放在当时做实验的实验室，移去皿盖，使琼脂培养基表面暴露在空气中；将另一肉膏蛋白胨琼脂平板放在无菌室或无人走动的其他实验室，移去皿盖。1h后盖上2个皿盖。 （2）实验台、桌面和门旋钮 。 （a）取棉签 根据课本P7，左手拿含有棉签的试管，在火焰旁用右手的手掌边缘和小指、无名指夹持棉塞（或试管帽），将其取出（图Ⅱ-2，B），将管口很快地通过煤气灯（或酒精灯）的火焰，烧灼管口；轻轻地倾斜试管，用右手的拇指和食指将棉签小心地取出（图Ⅱ-2，C）。放回棉塞（或试管帽）（图Ⅱ-2，D），并将空试管放在试管架上； （b）弄湿棉签 左手取灭菌水试管，如上法拔出棉塞（或试管帽）并烧灼管口，将棉签插入水中，再提出水面，在管壁上挤压一下以除去过多的水分，小心将棉签取出，烧灼管口，放回棉塞（或试管帽），并将灭菌水试管放在试管架上； 　（c）取样 将湿棉签在实验台面上擦拭约2平方厘米的范围； （d）接种 将棉签迅速从平板开启处伸入，在标有E区域滚动一下，立即闭合皿盖，弃去棉签； （e）重复步骤（a）、（b）、（c），在门旋钮和桌面取样，完成F、G的接种； （f）在H区接种无菌水作为对照。 3．人体表面微生物的检查 　　（1）手指（洗手前与洗手后） 　　 　　（a）移去皿盖，将未洗过的手指在平板A区域轻按，而后迅速盖上皿盖； 　　（b）用洗手液洗净双手，自然干燥后，在平板的B区域上轻按，迅速盖上皿盖； 漂洗的手(只用清水) 洗净的手(用皂液) 洗净的手(用消毒剂) 　　（2）头发 将你的1～2根头发轻轻放在平板的C区域，迅速盖上皿盖。 　　（3）鼻腔 　　（a）按照实验台检查法的步骤（a）和（b），用湿棉签在鼻腔内滚动数次，立即在D区域轻轻摩擦2～3次，迅速盖上皿盖。 　（4）培养 将以上实验的平皿底面朝上，放在37℃温度下培养1～2天，取出观察，记录并分析结果。