细胞化学染色检验课件篇.ppt

中性粒细胞碱性磷酸酶染色 neutrophilic alkaline phosphatase NAP * 原理 中性粒细胞碱性磷酸酶的染色方法有Gonmori钙-钴偶联法和kaplow偶氮偶联法。 * Kaplow偶氮偶联法 磷酸萘酚钠 萘酚 包浆中NAP PH9.6 重氮盐 不溶性紫黑色沉淀 * 正常细胞染色反应 NAP主要存在于中性成熟粒细胞（包括中性杆状核细胞和分叶核细胞），故成熟中性粒细胞胞浆呈阳性，其他细胞基本阴性。 * 结果判读 胞浆中有紫黑色颗粒结果为阳性，分为+，++，+++，++++，分别为1分、2分、3分、4分，100个细胞中阳性细胞的积分之和即为积分值。 * 参考范围 阳性率40%,NAP积分值为30~130分。 * 临床意义 1、NAP积分增加：见于细菌性感染（类白血病反应）、再生障碍性贫血、某些骨髓增殖性疾病（慢粒、骨髓纤维化、真性红细胞增多症、原发性血小板增多症）、慢性粒细胞白血病、急性淋巴细胞白血病、恶性淋巴瘤、骨髓转移癌、雄激素治疗等。 * 2.NAP积分下降：慢性粒细胞白血病慢性期、急性粒细胞白血病、阵发性随眠性血红蛋白尿、骨髓异常增生综合征、恶性组织细胞病。 * 应用评价 NAP主要用于慢性粒细胞白血病与类白血病反应、PNH与再障及急性白血病类型的鉴别。 本实验影响因素较多，如试剂、生理性波动及试验人员及判断标准等，使结果相差较大，各单位应建立本实验室参考标准。 * 过氧化物酶染色peroxidase POX * 原理 血细胞中所含主要为髓过氧化物酶MPO，MPO是人类中性粒细胞含量最多的一种蛋白质。POX染色方法有多中：复方联苯胺法、二甲基联苯胺法、四甲基联苯胺法等。 * 二甲基联苯胺法： 过氧化氢 新生态氧 过氧化物酶 二氨基联苯胺 不溶性沉淀 * 正常细胞染色反应 1.粒细胞系统 分化差的原始粒细胞为阴性 分化好的原始粒细胞至成熟粒细胞各阶段均呈阳性。阳性程度随细胞成熟增强。 嗜酸性粒细胞阳性最强，嗜碱性粒细胞阴性。 * 2.单核细胞系统：阴性或弱阳性 3.其他细胞：淋巴、红系、巨核系均为阴性，浆细胞，组织细胞可阴性，可阳性。 * 临床意义 辅助诊断急性白血病的首选，主要用于鉴别急性髓细胞白血病和急性淋巴细胞白血病。 * 急性淋巴细胞白血病：原始淋巴细胞及幼稚细胞均呈阴性，实际上急性淋巴细胞患者骨髓中可残留部分原始粒细胞，而出现阳性，故参考范围为阴性或阳性3% * 急性粒细胞白血病：原始粒细胞阴性或阳性，常阳性，为+~++，阳性颗粒数较多，颗粒较粗大， 急性早幼粒细胞白血病：早幼粒细胞呈强阳性，+++~++++ 急性单核细胞白血病：原始单核和幼稚单核细胞呈阴性或弱阳性，其阳性颗粒少而细小。 * 急性红白血病：原始粒细胞呈阳性或阴性，原始单核细胞呈阴性或弱阳性，有核红细胞呈阴性 中性成熟粒细胞POX活性下降：见于骨髓异常增生综合征、放射病、退化的中性粒细胞及某些白血病。 * 应用评价 POX染色是急性白血病形态学分型中最重要、首选的常规细胞化学染色。 POX染色涂片上细胞结构不如瑞氏染色清楚，且阳性细胞中已有阳性颗粒覆盖，一定程度上干扰白细胞颗粒判断。 * POX染色测定MPO的敏感性明显低于流式细胞术对MPO测定，所以POX染色阴性的患者并不等于白血病细胞中不存在此酶，需用流式细胞术进行确认。 * 苏丹黑染色 苏丹黑B（sudan black B，SBB）是一种脂溶性的重氮染料，能溶解细胞内的含脂结构（如中性脂肪、磷脂、糖脂和类固醇），而使脂类物质显示出来，呈深黑色或棕色，脂类物质在粒细胞中丰富，单核细胞少量。 * 正常血细胞的染色反应和临床意义基本同POX染色 * 应用评价 虽然SSB染色临床意义与POX染色基本相同，但其敏感性和特异性存在差异。 SSB特异性低于POX染色，敏感性高于POX染色。 * 感谢您的关注！ * P o w e r B a r 中国专业PPT设计交流论坛 细胞化学染色 * * 临床应用 辅助判断急性白血病的临床类型。根据细胞化学染色结果不同，可推断细胞所属系列。 辅助血液系统疾病的诊断和鉴别诊断。由于血细胞在病理情况下，其化学成分及含量发生变化，可以辅助疾病的诊断，如中性粒细胞碱性磷酸酶染色、铁染色等。 * 细胞染色的基本步骤 固定