细胞膜融合机制186.ppt

病毒与细胞 细胞内 膜系统 细胞与 细胞 膜融合的分子机制 因为细胞表面比病毒包膜表面存在更多的糖蛋白，并且在细胞与细胞融合前细胞会发生分化、粘连和迁移，这些原因在一起，决定了寻找细胞表面的融合蛋白非常困难，尽管这样，这一领域目前仍取得了一些成果。 CD9,CD81,GPI锚蛋白 Izumo EFF-1,EFF-2 病毒与细胞 细胞内 膜系统 细胞与 细胞 膜融合的分子机制 病毒与细胞 细胞内 膜系统 膜融合的分子机制 细胞与 细胞 根据目前所取得的研究结果，我们不妨做如下推测： (2)各类膜融合采用的分子机制应该是不同的。I、Ⅱ类病毒采用了类似的“发夹”结构，囊泡采用了“类亮氨酸拉链”，细胞间的融合很可能采用其它一种或多种结构，并且它的融合机制也更为复杂，牵涉到信号转导、特定基因的转录、细胞骨架的变化、核的变化等。 (1)在生物体中，各种膜不仅基本组成类似，而且大多都形成脂质双分子层，因此，融合过程中脂质双层的变化可能是基本相同的； 膜融合失败导致的疾病 不孕症 先兆子痫 骨畸形 膜融合治疗 制作主讲：庞宇航 2010年4月 植物体细胞杂交又称为原生质体融合，是 1.由于植物体细胞有细胞壁，阻碍了细胞的融合，所以先要用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，从而得到有活性的原生质体 2.诱导原生质体融合的方法目前有三种：物理方法（离心、振动、电刺激），化学方法（聚乙二醇PEG），生物方法（灭活的仙台病毒） 3.筛选和培养 * * 膜的融合是许多基本的生命活动所必须的，如包膜病毒感染宿主细胞，细胞内物质的运输与释放，精卵融合产生受精卵，使生命延续；哺乳动物胎盘中，滋养层融合形成合胞体层细胞(合胞体一滋养层)等等。 * * 髓鞘是包裹在神经细胞轴突外面的一层膜 包膜病毒在适宜的条件下靠近宿主细胞，接着在融合蛋白的帮助下，病毒和寄主膜被相向拉伸，两者膜的外小叶发生局部点接触，此时本来排列有序的脂双层稳定性降低，外小叶发生紊乱、重排，继而成为一体，这一过程称为半融合。在半融合中，内层小叶未发生融合，成为两单层脂质的隔膜，形似对合的“叶柄”样结构。半融合结构中，两内层小叶不含有任何膜蛋白成分，而仅仅是由脂类构成。J．wong等 在观察海胆卵融合时发现：半融合状态非常稳定，活体细胞可以维持这种半融合状态长达几小时、几天、甚至几个月。半融合后，延伸中的隔膜上的压力促使内层小叶融合形成融合孔，最后融合孔继续扩大，使两套膜成为一体。这一过程中，随着融合进行，耗费的能量越来越大。如：半融合结构的形成有一个较小的能量壁垒，融合孔的形成需要较多的能量，而融合孔的扩大则需要更大的能量来完成。 * 各种各样天然的膜融合事件大致可分为四类：病毒一宿主细胞间的膜融合；细胞内单层膜间的融合(包括胞内膜和细胞膜的融合，下同)；细胞内双层膜间(如线粒体)的融合；细胞间的膜融合。四类膜融合事件中，目前为止，以病毒一宿主细胞间的膜融合研究得最为详细，取得的成果也最多，而细胞间的融合了解的最少。 * 探索膜融合分子机制的关键是寻找介导膜融合的蛋白，因为正是它将独立的两个膜单位拉在一起，从而允许随后的融合事件发生。包膜病毒的膜蛋白较少，筛选起来比较简单，因而对融合的分子机制的研究也是从此人手，研究的结果也为其他类的膜融合研究提供了有益的借鉴。 * 2．1 病毒与细胞间的融合 根据融合蛋白主要的结构特征，我们可以暂时将包膜病毒分为I类，Ⅱ类和其他类病毒三种 。其中I、Ⅱ类病毒都利用了融合蛋白形成的“发夹”构型介导了融合 。 * 在I、Ⅱ类病毒．寄主细胞融合过程中，融合蛋白一般要经历诱发，插入，变构等变化来促进膜的融合 。I、Ⅱ类病毒的融合蛋白都含有一段疏水性的肽链，I类病毒称为融合肽，Ⅱ类病毒称为融合环。在诱发之前，I类病毒的融合肽处于融合蛋白三聚体内部(Ⅱ类病毒的融合环位于同源或异源二聚体内部)远离外界的极性环境。在适合的条件下，低的pH值或(和)结合受体或酶的作用等，经历诱发，融合肽暴露，接着融合蛋白向宿主膜伸出，将融合肽(环)插入目标膜中(与此同时，在Ⅱ类病毒感染中发生融合蛋白三聚化)。随后融合蛋白构型发生变化，本来位于融合蛋白两端的融合肽和跨膜域靠近，从而带动两外层小叶融合，最终，形成了插入目标膜的融合肽(环)与锚定在病毒膜的跨膜域处于同一端的“发夹”结构(图2)。正是这一结构形成，将两套膜紧紧地拉在了一起，导致了融合。但是在这两类病毒中构成“发夹”的融合蛋白二级结构不同，I类病毒的发夹由 螺旋构成，而Ⅱ类病毒则主要由B折叠片构成。除I、Ⅱ类病毒外，其他的包膜病毒可能也利用了二级结构同样、类似或不同的“发夹”结构介导了融合，也可能采用了完全不同于“发夹”的分子机制。 * ?二类病毒与一类病毒膜融合机制有很多相似处，包括都含有无融合活性的融合糖蛋白前体；