单细胞水平同位素拉曼散射研究.pptxVIP

单细胞同位素拉曼散射分析; 前言 细胞是生物体结构和功能的基本单位，环境生态中的所有物质转化和生命活动现象，只有基于细胞的分析才能得到本质上的阐述，而细胞的生命驱动力是细胞代谢，解析细胞代谢的过程，展现其瞬时动态图像，是一切生物转化相关过程研究在方法学上必须最终解决的问题，其关系到生态学，环境学，生物学，生物医学等众多相关领域，具有重大意义。; 单细胞同位素拉曼散射是一种非破坏性的，非细胞培养的，集共聚焦显微、拉曼非弹性散射及其与同位素标记探针技术结合为一体的分析技术。共聚焦显微可以实现分析对象在细胞或亚细胞尺度上的测度，而拉曼非弹性散可以贯穿细胞，包含有几乎所有细胞储藏大分子指纹的信息，加之水介质的拉曼背景信号小，可实现对细胞的整体分析，若同时采用同位素探针技术，可以将功能过程示踪与??物系统发育信息相联系，进行功能与分类的耦合分析，以及元素生态循环和细胞代谢等系统生物学研究。; 1.激光共聚焦显微成像技术 以激光作为光源，激光器发出的激光通过照明针孔形成点光源， 经过透镜、分光镜形成平行光后，再由物透镜聚焦在样品上，对样品内聚焦平面上的每一点进行扫描，样品激发的光信号，通过分光镜分光，再经像透镜聚焦，到达探测针孔处，被后续的光电倍增管检测，并在显示器上成像，得到所需的荧光图像，而非聚焦光线被探测针孔光栏所阻