地被菊雨花勋章再生和遗传转化体系的建立-南京农业大学学报.PDF

南京农业大学学报 　2009, 32 (2) : 4046 　 J ou rna l of N anj ing A g ricu ltu ra l Un ivers ity h ttp : / / nauxbnjaueducn 崔新利 , 陈发棣 , 陈素梅. 地被菊雨花勋章再生和遗传转化体系的建立 [ J ]. 南京农业大学学报 , 2009 , 32 (2) : 4046 地被菊雨花勋章再生和遗传转化体系的建立 崔新利 , 陈发棣 , 陈素梅 (南京农业大学园艺学院 , 江苏 南京 2 10095) 摘要 : 以匍匐型地被菊雨花勋章叶片为外植体 , 建立了其高频再生体系及根癌农杆菌介导的稳定遗传转化体系 。结果表 明 , 不同激素配比对叶片离体再生影响很大 , 以 M S + 10 m g ·L - 1 6BA + 10 m g ·L - 1 NAA 的诱导率最高 , 达 911% ; 分化前期一定时间的暗培养可防止愈伤组织褐变 , 提高再生率 。预培养 3 d, 侵染 10 m in, 共培养 3 d, 延迟培养 3 d为 最优转化体系 ; 乙酰丁香酮导致外植体褐化加速 , 不利于转化 。叶片对潮霉素十分敏感 , 叶盘再生筛选以 6 ～8 m g ·L - 1 为宜 , 生根筛选以 7 m g ·L - 1为宜 。羧苄青霉素抑菌质量浓度以 250 ～350 m g ·L - 1为宜 。获得的抗性芽部分株系经 PCR 检测初步证实外源基因已转入植物基因组 DNA 中。 关键词 : 匍匐型地被菊 ; 再生体系 ; 根癌农杆菌 ; 遗传转化 中图分类号 : S682 1+ 1　　　文献标志码 : A 　　　文章编号 : (2009) Establishm en t of regenera tion and tran sforma tion system of groundcover chry san them um Y uhuaxunzhang CU I X inli, CHEN Fadi , CH EN Su m ei (Co llege of Horticu ltural, N anj ing A gricu ltural U n iversity, N anj ing 2 10095, Ch ina) Ab s tra c t: U sing leaf disk s of groundcover chrysanthemum Yuhuaxunzhang a s exp lan ts, an efficien t and reliab le regeneration and tran sform ation system wa s e stab lished. The re su lts showed that the conten t and p roportion of differen t p lant regu lators affected greatly the regeneration of leaves. The op tim um m edium for the h ighest differentiation rate amounting to 911% was M S m edium w ith