遗传学经典课件 第09章 基因突变推荐.pptVIP

Muller-5技术 * 并连X染色体 如有隐性突变，F1雄蝇就出现相应性状 * 常染色体突变的检出 平衡致死法 * 植物突变的检出 玉米 胚乳为三倍体 拟南芥 模式植物，实验室易培养 * * * 突变发生在群体中的不同个体、同一个体的不同组织、同一组织的不同细胞、同一细胞的不同基因、同一基因的不同碱基对 * 第一例早老病是90多年前（1898年）英国医师霍奇逊发现的，那患儿先天性无头发，皮肤严重萎缩。第二年，另一位医师作了尸体解剖，并提出了早老病这个病名。 化学诱变剂 种类 多为致癌剂，如秋水仙素、芥子气、黄曲霉素B1等 特点 操作方便，可以大大提高诱变率 常集中在染色体上的某一区域，使突变具一定的定向作用 * 黄曲霉素B1 在鸟嘌呤的N-7上形成一个加成复合物，继而产生无嘌呤位点 需要SOS系统参与 引起G-C颠换为T-A * 体外定点突变 1985年加拿大的Michael Smith建立，于1993年获得了诺贝尔化学奖。 具体方法有三种： （1）寡聚核苷酸介导的用单链模板定点突变； （2）双引物法定点突变； （3）用掺入U的单链为模板进行聚核苷酸介导的体外定点突变。 * 体外定点突变site-directed mutagenesis * 寡核苷酸定点突变步骤 人工合成靶碱基及其附近序列的寡核苷酸 与M13DNA克隆的互补单链杂交，在Klenow酶作用下合成完整的互补链 连接酶连接，导入大肠杆菌中，得到稳定的突变克隆 将突变基因导入原来的细胞基因组中，在生理条件下研究和检测突变的效应。 * 反向遗传学reverse genetics 经典遗传学 突变表型 突变基因型 反向遗传学（反求遗传学） DNA突变 表型效应改变 * 增变基因 Mutator genes 基因组中某些基因的突变可以使整个基因组的突变率明显上升，这些基因就是增变基因 DNA聚合酶的各个基因。 dam基因，与错配修复等修复系统有关的基因。 * 突变热点hot spots of mutations DNA的不同部分有着不同的突变率 突变位点在基因内的分布不随机 5-甲基胞嘧啶 短重复序列 与诱变剂性质有关 * 生物体的修复机制 光复活photoreactivation 切除修复excision repair 重组修复recombinational repair SOS修复 * 光复活 专一地针对紫外线引起的DNA损伤而形成的嘧啶二聚体在损伤部位就地修复的途径。 在300－600纳米的可见光，由光复活酶催化二聚体分解为单体 普遍存在，但主要是原核生物中的修复方式。 * 切除修复 也叫暗修复 在几种酶的协同作用下，将损伤的DNA部分切除，缺口由修复性合成来填补，再由连接酶连接成完整的链。 短补丁修复：占多数，切除约20个核苷酸 长补丁修复：约1500个核苷酸 * 切除修复 * 特异切除修复途径 DNA糖基化酶修复途径（碱基切除修复） DNA糖基化酶切开N-糖苷键，产生无嘌呤无嘧啶位点（AP位点），由AP内切酶修复系统修复 AP内切酶修复系统 对于嘌呤或嘧啶脱落后的AP位点，由内切酶切开磷酸二酯键，启动由外切酶、DNA聚合酶I和DNA连接酶作用的切除修复过程。 * 重组修复 又称复制后修复 在复制时越过损伤部位，留下的缺口由重组进行填补。 损伤并没有被真正修复，只是在复制中被稀释。 容易产生差错，引起突变 * SOS修复系统 DNA分子损伤较大而复制受到抑制时出现的修复作用，是旁路修复系统。 细胞受到危急状态时的修复方式，允许DNA复制越过二聚体而进行，因而引起错配，导致突变。 * SOS修复系统 * SOS修复系统 复制到损伤部位时，经过短暂的抑制，产生一种新的DNA聚合酶，能催化损伤部位的DNA的修复合成，但识别碱基的精确度低。 在新链中，二聚体相对的位置上可以出现任何碱基，其他位置上也可以出现错配。 * SOS修复中的recA基因和lexA基因 * 电离辐射损伤的修复 超快修复：可能由DNA连接酶单独完成 快修复：需要DNA多聚酶I的参与 慢修复：需要重组修复的酶系统参与 * DNA损伤修复与基因突变、癌的发生以及衰老等密切相关 * 突变与癌 黄曲霉素（AFB1）引起肝癌；紫外线诱导皮肤癌 抑癌基因（p53基因）突变会致癌 南非人群中肝癌病人中，p53基因被AFB1诱导特异性的G?T颠换 人类鳞状细胞皮肤癌也多有p53基因的突变，在嘧啶二聚体出产生C?T转换 * 修复缺陷与疾病 DNA修复系统缺陷而引起的遗传病，还有较高的致癌率 着色性干皮病(xeroderma pigmentosum, XP) 常染色体隐性基因，位于1q，