SPF级KM小鼠主要脏器重量和血液生化值的测定.doc

SPF级KM小鼠主要脏器重量和血液生化值的测定 作者：夏介英 雷培琪 曾晓兰 李鹤 【摘要】 目的：建立本实验动物中心SPF级KM小鼠主要脏器，血液及血生化等指标的背景资料，并分析比较雌雄之间的差异。方法：(1)选取同日龄出生的SPF乳鼠200只，雌雄各半，分别在28、56、114日龄时随机抽取60只(雌雄各半)，活体称重，依次剖取心、肝等主要脏器器官称重，计算脏器系数。(2)同时采集28日龄SPF小鼠60只(雌雄各半)的血液，作血液学和血生化测定。结果：(1)同期雌、雄小鼠的心、肝、肺、肾、胸腺脏器系数差异显著(Plt;0.01);随着日龄增长心、肝、脾、肾、肾上腺和胸腺系数变小，但睾丸、附睾、卵巢和子宫系数增大。(2)28日龄雌、雄小鼠血液学检查表明HCT和PLT有差异(Plt;0.05);血生化检测表明ALT、AST、AKP、GLU、TG之间差异不显著(Pgt;0.05)，但CRE、TC、BUN结果差异显著(Plt;0.01)。结论：性别因素对脏器重量、脏器系数以及血液、血生化指标都有一定的影响。 【关键词】 SPF小鼠;脏器重量;脏器系数;血液细胞学检查;血生化指标 本中心SPF级屏障系统建成后，自2005年6月从国家实验动物种子中心引种SPF级小鼠进行保种和扩大饲养，经过多年的积累，已形成了一定规模的实验动物群。主要服务于本院的新药开发等项目。为建立本中心实验动物主要脏器，血液学及血生化等指标的数据档案，同时为使用该群实验动物的科研人员提供明确的参考数据，我们进行了一系列的动物实验。现将SPF级KM小鼠的主要脏器重量及其系数、血液细胞学检查及主要的血生化测定值实验报告如下。 　　1 材料和方法 　　1.1 实验动物和生长环境 　　实验动物是本中心所养SPF级KM小鼠，饲养于屏障系统中。屏障内空气洁净度为10000级，全新风;温度控制在20°C～26°C，且日温差小于3°C;湿度为40%～70%;压力剃度为20～50Pa;光照12h/天，氨浓度小于14/m3，噪音小于60分贝。动物行自由采食和饮水。饲料成分：粗蛋白质21.8%，粗脂肪5.0%。饲料、垫料经高压消毒处理，饮用水是实验动物饮用纯水机制备的无菌水,添加盐酸至PH2～3。饲养动物的笼具每周更换一次，饮用水瓶每周一、三、五更换。实验动物生产许可证号为：SCXK(川)2005-19。 　　1.2 检测仪器与材料 　　称量所用天平分别为ELECTRONICT100(精度0.01g)和ELECTRONICJA1203N(精度0.001g)，由上海天平仪器总厂生产;血液学检查采用日本东亚KX121型全自动电脑血球计数仪;血液生化检测采用LDZ4-0.8型离心机，日立7020型全自动生化分析仪。检测所需试剂：GLU(批号0707071)、AKP(批号0607051)四川迈克生化有限公司生产;ACT(批号ZG7002)、AST(批号ZG7002)、BUN(批号ZG7003)希森美康公司生产;CRE(批号070501)上海东方公司生产;TG(批号070607)、TC(批号070601)伊利康生化有限公司生产。 　　1.3 测定方法 　　1.3.1 体重和脏器系数的测定随机抽取同日出生SPF级KM乳鼠200只，雌雄各半，常规饲养，分别在28日龄、56日龄、114日龄时随机抽取60只小鼠(雌雄各半),空腹12h，然后活体称重，颈椎脱臼处死，剖开胸、腹腔，依次取出心、肝、脾等主要器官，剔除脂肪和筋膜，挤尽血液，用滤纸吸干表面的液体，称重并计算脏器系数。脏器系数(%)=脏器重量(g)/体重(g)×100。(见表1)。 　　1.3.2 血液学指标测定 将28日龄SPF级KM小鼠60只(雌雄各半)于处死前麻醉，拔眼珠取血，检测项目：白细胞计数(WBC×109·L-1)、红细胞计数(RBC×1012·L-1)、血红蛋白(HGB g·L-1)、红细胞压积(HCT g·L-1)和血小板计数(PLT×109·L-1)。(见表2)。 　　1.3.3 血液生化检查将所取血液离心，转速2000转·min-1,10分钟后分离血清,采用日立7020型全自动生化分析仪进行生化检测。检测指标：血糖(FPG,氧化酶法)、谷丙转氨酶(ALT,LDHUV法 )、谷草转氨酶(AST,MDHUV法)、碱性磷酸酶(AKP,AMP法)、肌酐(CRE,酶法)、甘油三酯(TG,GPOPAP法)、总胆固醇(TC,CODPAP法)和尿素氮(BUN,酶法)。(见表3)。 　　1.4 统计方法 　　所有测定值均以平均数()±标准差(s)表示，采用t检验。 　　2 结果 　　2.1 不同日龄SPF小鼠主要脏器重量(mg)、脏器系数(%)测定结果(见表1) 　　统计结果表明，同期雌、雄小鼠间比较得出体重、心、肝、肺、肾