赣榆县外国语学校2014年高考一轮复习生物课件：基因工程.pptVIP

选修3 现代生物科技专题第一部分 基因工程 考纲解读 一.考点分频 1.基因工程的原理和技术 2.基因工程的应用与发展 二.命题规律 1.常考内容：近五年考题中主要考察基因工程原理技术操作和应用。 2.常考类型：主要以非选择题为主，考察工具酶和运载体的功能及基因操作的基本步骤 * 考点一 基因工程的工具 1.限制性核酸内切酶 作用实质 作用结果 作用特点 来源 多数来自原核生物 只能识别和切割DNA分子中一小段特殊的核苷酸序列 形成黏性末端或平末端 使特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开 高频考点突破 2.DNA连接酶 （1）作用实质：将具有末端碱基互补的2个DNA片 段连接在一起，形成重组DNA分子。 （2）限制性核酸内切酶不切割自身DNA的原因 是：原核生物中不存在该酶的识别序列或识别序 列已经被修饰。 （3）DNA连接酶起作用时不需要模板。 3.DNA连接酶、DNA聚合酶和限制性核酸内切酶 限制性核酸内切酶与DNA连接酶的关系 连接部位 单链 双链 连接DNA链 DNA聚合酶 DNA连接酶 在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键 将单个核苷酸加到已存在的核酸片段上，形成磷酸二酯键 4.基因工程的载体——质粒 (1)作用 ①作为运载工具，将目的基因转移到宿主细胞内。 ②利用它在宿主细胞内使目的基因进行大量复制。 (2)具备的条件 ① ② ③ 能在宿主细胞内稳定保存，并大量复制. 有一个或多个限制性核酸内切酶切割位点， 以便与外源基因连接. 具有某些遗传标记基因（多为抗性基因），以便进行筛选. 拓展提升 ①一般来说，天然载体往往不能满足人类的所有 要求，因此人们根据不同的目的和需要，对某些 天然的载体进行人工改造。 ②限制性核酸内切酶切割位点所处的位置必须是在所需的标记基因之外，这样才能保证标记基因的完整性，有利于对目的基因的检测。 对位训练 1.下列有关基因工程中限制性核酸内切酶的描述， 错误的是 （ ） A.一种限制性核酸内切酶只能识别一种特定的脱 氧核苷酸序列 B.限制性核酸内切酶的活性受温度的影响 C.限制性核酸内切酶能识别和切割RNA D.限制性核酸内切酶可从原核生物中提取 C 2.下列关于DNA连接酶作用的叙述，正确的是 （ ） A.将单个核苷酸加到某DNA片段末端，形成磷酸 二酯键 B.将断开的两个DNA片段的骨架连接起来，重新 形成磷酸二酯键 C.连接两条DNA链上碱基之间的氢键 D.只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间连接 起来，而不能将双链DNA片段平末端之间进行 连接 B 考点二 基因工程的基本操作步骤 1.获得目的基因 （1）如果目的基因的序列是已知的，可用化学方法合成目的基因，或者用聚合酶链式反应(PCR)扩增目的基因。 （2）如果目的基因的核苷酸序列是未知的，可以从基因文库中获取。 2.形成重组DNA分子 3.将重组DNA分子导入受体细胞 氯化钙处理细菌细胞→细菌细胞壁的通透性增加→重组质粒进入宿主细胞 将含有目的基因的表达载体提纯→取卵(受精卵)→显微注射→受精卵发育→获得具有新性状的动物 将目的基因插入Ti质粒的DNA上→农杆菌→导入植物细胞→整合到受体细胞的DNA上→表达 转化过程 原核细胞 受精卵 体细胞 受体细胞 微生物细胞 动物细胞 植物细胞 生物种类 4.筛选含有目的基因的受体细胞 (1)原理：质粒上有抗生素的抗性基因。 (2)方法：利用选择培养基筛选。 (3)举例 5.目的基因的表达 (1)场所：含重组DNA分子的受体细胞中。 (2)标志：表达“目的基因”所控制的性状。 对位训练 3.下列有关基因工程技术的叙述，正确的是（ ） A.重组DNA技术所用的工具酶是限制性核酸内切 酶、连接酶和载体 B.所有的限制性核酸内切酶都只能识别同一种特 定的核苷酸序列 C.选用细菌作为重组质粒的受体细胞是因为细菌 繁殖快 D.只要目的基因进入受体细胞就能实现表达 C 解析 基因操作的工具酶是限制性核