输血前配合性试验技术汇.ppt

输血前配合性试验技术;主要内容;输血风险;血型定型是基础 目的：准确定型，选择相容血液 意义：输血安全、有效;一、ABO和Rh血型鉴定;红细胞常规ABO定性;鉴定方法介绍;2）微柱凝胶法 过滤介质为颗粒直径26-103 nm的葡聚糖100凝胶，凝胶间缝隙只允许游离红细胞通过，与抗 体反应的红细胞不能通过。 工作程序和结果的判读易于标准化，自动化。该实验方法还具有所需标本少、结果准确、抗干扰能力强、溶血和脂血影响少、重复性好等优点，有利于实验室的质量控制，提高工作效率。;微柱凝胶法结果; 3）PCR血型基因分型 包括PCR-SSP(PCR-序列特异性引物)技术、 PCR-SSO(PCR-序列特异性寡核苷酶探针)技术、PCR-SSCP(PCR-单链构象多态性)技术、基因芯片等。 ;基因分型技术的应用： ①疑难血型鉴定：ABO 血型亚型的鉴定、血型抗原减弱个体的血型鉴定、抗体消失的血型鉴定、获得性B的鉴定等 ②直接抗人球蛋白试验阳性的患者血型鉴定 ③亲子鉴定及法医应用等;4) ABO血型的流式细胞术检测 方法和原理是用荧光素标记人源抗-A、抗-B 单克隆抗体，与待测标本中的红细胞反应,然后用流式细胞术检测待测标本中细胞与抗-A、抗-B 单克隆抗体的结合情况 成本高、操作复杂,非常规方法 利用流式细胞术对孕妇血流中微量的胎儿红细胞进行检测可以实现非侵入性胎儿血型鉴定;抗原抗体比例：一般认为增加抗体量能提高检测敏感性，极少有显著性抗体过量而抑制凝集反应者（前带现象）。 2滴血清+1滴 2%～5%红细胞 必要时血清增加到10～20滴 前带现象：一种抗原-抗体反应的现象。以定量抗原检测抗体，若抗体过剩，可使所形成的免疫复合物反而减少，而不出现凝集。;盐水试验多采用立即离心法,正确的操作是红细胞悬液加到血清后立即离心并观察结果。反应时间过长而延误立即离心的时间对ABO血型系统的抗体检出影响较大。 ①如果在室温放置2分钟后离心,可能使凝集减弱,并伴有溶血现象。 ②如果在室温放置5分钟后离心,原有的凝集可能消失,并有溶血。 ;常规定型试剂要求;ABO定型试验中的常见问题; 5）近期输血：试验前输入ABO血型不一致的红细胞，使血液标本成为混合血型的红细胞悬液，定型时显示“混合外观凝集”现象。 6）嵌合体血型（开米拉，chimerism）:这种血型者体内有两类红细胞群体，定型时可以出现“混合外观凝集”现象。 7）疾病因素导致抗原减弱：某些白血病患者和难治性贫血患者等。 8）红细胞多凝集现象：红细胞因遗传或获得性的表面异常，发生多凝集现象。 ; 9）获得性B：由于革兰阴性杆菌的作用，红细胞可获得“类B”的活性。 10）血型特异性物质过高：一些卵巢囊肿病例，血型物质的浓度很高，可中和抗A和抗B定型试剂，要得到正确的正定型结果，必须洗涤红细胞多次。 11）近期内进行大量的血浆置换治疗：由于使用大量的非同型的血浆作置换治疗，造成反定型错误。 12）异常的血浆蛋白：受检者血浆中异常的白蛋白、球蛋白比例和高浓度的纤维蛋白原等导致缗钱状形成，造成假凝集现象。 ; 13）不规则抗体的存在 14）低丙种球蛋白血症:低丙种球蛋白血症（丙种球蛋白量减低）病例，可能会因免疫球蛋白水平下降而使血清定型时不凝集或弱凝集反应。 15）药物等因素：药物、右旋糖酐及静脉注射某些造影剂引起红细胞凝集或类似凝集。 16）年龄因素：免疫系统尚未健全的婴儿、由母亲被动获得抗体的婴儿，或抗体水平下降的老人，试验时可出现异常的结果。 17）防腐剂因素; 正反定型不符的解决; 反定型中意外阳性或阴性的解决办法： 血清和筛选A1细胞阳性、A2细胞阴性、自身阴性：可能是含有抗A1的A或AB型 部分筛选细胞阳性、自身阴性：血清中含有意外抗体,用一组谱细胞,确定抗体特异性 室温盐水反应抗体：MN、P、Lewis 排除冷抗体及缗钱状凝集 排除多凝集 ;正反定型不一致的思考及解决;ABO正反定型不符病例分析;ABO正反定型不符病例分析;ABO正反定型不符病例分析;正反定性不符病历;正反定型的意义; 美国FDA分析了1976～1985年间输血导致的死亡原因，发现ABO血型错误输血导致的死亡占总死亡数的51％。而这种错误一般都是责任事故，基本没有技术原因，主要与管理有关。 ;2．Rh血型鉴定; D抗原决定Rh是否阳性。 Rh阴性分布频率：白种人15～20% 中国人 0.4% 中国汉族0.34% 大约1/3的Rh阴性的人，经Rh阳性抗原 免疫后，不产生抗D。 ; Rh血型抗原的免疫原性 Rh血型抗原的抗原性强度可能仅次于A和B抗原，