玉竹组织培养技术研究.pptVIP

主要技术路线 * * 玉竹组织培养技术研究 系 别：生命科学系 指 导 教 师：李亦斌 魏彦煜 项目组成员: 张印江 王梦龙 邓亚男 袁玉婷 汇报提纲 一、立项背景和依据 三、主要技术路线 四、玉竹组织培养材料和方法 五、实验所得数据及分析 二、研究的主要内容和目标 玉竹[Polygonatum odoratum (Mill．)Druce]为百合科黄精属多年生草本植物，又名萎蕤、地管子、尾参等。其根状茎入药，性味甘、有养阴润燥、生津止渴的功效，是我国常用名贵中草药。近年来，玉竹已扩展到医药保健和食疗、美容领域，并出口日、韩、加拿大、东南亚等国家，取得了良好的经济效益。 目前玉竹生产面临着诸多问题。良种繁育和种苗源匮乏是制约玉竹资源利用的瓶 立项背景和依据 颈。自然条件下，玉竹分根增殖、种子繁殖，但其用种量大、出苗率低 。野生玉竹因长期采挖，资源枯竭。其次，种性退化严重，质量不稳定。因此，寻找玉竹高效快速繁殖途径显得尤为重要。 我们认为，利用组织培养技术，快速繁殖玉竹苗，是解决用种量大、种苗源匮乏，种性退化严重的有效方法。 立项背景和依据 以玉竹根状茎、花瓣和茎段为外植体,于附加 不同激素配比的MS培养基中诱导愈伤组织、不定芽和不定根,探讨增殖培养和植株再生的条件 研究的主要内容和目标 1、研究主要内容： 2、研究目标： 筛选最适宜的玉竹组培快速繁殖外植体 筛选玉竹愈伤组织诱导培养基 筛选玉竹增殖与分化培养基 筛选玉竹生根培养基 材料新:玉竹具有药、食、美容价值,是最近几年才被重新发现的多年生植物，娄底市辖区县市是玉竹传统产区，玉竹资源丰富，为玉竹的大规模生产提供了可能。 产品性能新：研究表明，玉竹具有食用、药用和美容价值，经济效益高，发展前景好。 应用效果新：利用植物组织培养技术快速繁殖玉竹苗，大大减少了用种量。 研究的主要内容和目标 3、研究的创新点： 取材 愈伤组织诱导 增殖和分化培养 生根培养 培育出幼苗 大规模推广种植 ①取材：采集本地当家玉竹“猪屎尾”,取当年生花瓣、根状茎、茎段为外植体。对外植体用毛刷轻轻刷洗表面,再用洗洁精进行表面清洗,流水冲4～6h ,75%乙醇溶液消毒15～20 S，再用无菌水冲洗1次，0.2% 的升汞溶液消毒9～11 min，最后用无菌水冲洗4～5次。 ②愈伤组织诱导：将不同外植体分切后，接种于以MS为基本培养基，附加不同浓度6-BA(1.0、2.0、3.0 mg／L)、NAA(0.1、0.2、0.5 mg／L)IBA(0.1、0.2、0.5 mg／L)的培养基上进行组合试验，以确定最佳浓度配比的愈伤组织诱导培养基。 玉竹组织培养材料和方法 ③增殖和分化培养：将愈伤组织块分割转入增殖培养基，以MS培养基添加不同浓度的6-BA(1.0、2.0、3.0 mg／L)，NAA(0.1、0.2、0.5 mg／L)和IBA(O.1、0.2、0.5 mg／L)进行配比试验，筛选适宜的培养基。 ④生根培养：将具2～3片叶的苗转入生根培养基，以1／2MS培养基加入不同浓度的NAA(1.0、3.0、5.0 mg／L)，IBA(1.0、3.0、5.0 mg／L)进行筛选优化。 选取生长健壮的试管苗，室内炼苗4～6 d，冲洗掉培养基后移栽于沙和腐殖土(1：1)组成的基质中，浇透水，置于18～22℃下，适当保湿、遮阴，使其能够正常生长。 玉竹组织培养材料和方法 表1 MS培养基附加不同浓度激素对玉竹外植体愈伤组织诱导的影响 实验所得数据及分析 数据表明：花瓣和茎段外植体诱导愈伤组织和芽的分化率很低;而根状茎外植体易于培养。 表2 玉竹根状茎愈伤组织诱导芽的培养 实验所得数据及分析 数据表明：适宜根状茎外植体愈伤组织诱导的培养基为Ms+2.0 mg／L 6-BA+0.5 mg／L IBA 。 表3 1/2MS培养基玉竹生根诱导率与移栽成活率 实验所得数据及分析 数据表明：有利于增殖和丛生芽分化的培养基为Ms+2.0 mg／L 6-BA+0.5 mg／L IBA和Ms十3.0 mg／L 6-BA+0.1 mg／L NAA，而1／2MS+3.O～5.0 mg／L NAA适宜诱导试管苗生根培养。 本研究结果表明： 玉竹离体培养中，根状茎外植体对激素的敏感性较高，1.0 mg／L 6-BA+0.5 mg／L NAA (表 1)适合愈伤组织诱导，2.0 mg／L 6-BA+0.5 mg／L IBA (表 2)或