三种交叉配血实验方法应用效果评价.doc

三种交叉配血实验方法应用效果评价 ? 1l4?中国现代药物应用2011年5月第5卷第9期ChinJM0dDrugAppl.May2011,Vo!.5.No.9 一 套,滤过适量缓冲液后分别注入硫乙醇酸盐流体培养基和培养14d,观察结果(见表2). 改良马丁培养基各100ml,作为阴性对照,按前述规定温度 表2方法学验证结果统计表 注:表中+代表有菌生长,一代表无菌生长 以上3组平行试验结果表明,本品在该检验量下用d后才发现有菌生长,说明在该冲洗量下上述2种菌的抑菌 pH7.0无菌氯化钠一蛋白胨缓冲液以300ml/管的冲洗量冲活性尚不能完全消除.因此将冲洗量增加为500ml/管,800 洗,枯草芽孢杆菌,生孢梭菌,白色念珠菌及黑曲霉管中仅需ml/管,同法操作,验证结果(见表3). 2d就发现有菌生长,而金黄色葡萄球菌,大肠埃希菌管中4 表3方法学验证结果统计表 注:表中+代表有菌生长,一代表无菌生长 综合表3结果可以看出,在冲洗量为500m]/管的条件 下,对金黄色葡萄球菌,大肠埃希茵的抑菌活性已完全消除, 在冲洗量为800ml/管的条件下,滤膜由轻微的破裂,导致试 验失败,无法统计结果. 由此可以得出,本品采用薄膜过滤法进行无菌检查时, 缓冲液的冲洗量以500ml为最佳选择. 2.3.4样品的无菌检查取样品15支依上述方法同法操 作,以500ml/管的冲洗量冲洗,加入培养基后,按规定温度 培养14d,逐日观察,样品组2管均澄清;阳性对照管培养2 d后,菌落生长良好;阴性对照管培养14d均澄清;由此判定 供试品符合规定. 3讨论 目前,抗生素类药物的应用非常广泛,针对每种抗生素 类药物建立严格的质量标准,提高抗生素的质量就显得尤为 关键.所以对一个新品种建立无菌检查法时,对其方法进行 验证就显得尤为必要.薄膜过滤法作为无菌检查中的一种 方法,具有准确,方便,快捷的优点,是无菌检查时所采用的 一 种重要方法. 试验表明上述方法操作方便快捷,结果准确.所以,该 无菌检查方法验证对保证结果的可信度和准确性具有重要 意义. 参考文献 [1]中国药典委员会.中国药典2010年版.二部.北京:中国医药 科技出版社,2010. 三种交叉配血实验方法应用效果评价 张国平 【摘要】目的对盐水法,抗人球蛋白法及凝聚胺法交叉配血试验进行比较,评价三种交叉配血试 验方法的应用效果.方法输血送检血液标本1253例,同时选用盐水法,抗人球蛋白法及凝聚胺法进行 交叉配血试验.结果盐水法发现1例阳性结果,凝聚胺法发现3例阳性结果,且与抗人球蛋白法结果 吻合.结论凝聚胺交叉配血试验是安全有效,简便快速,切实可行的交叉配血方法,值得推广应用. 【关键词】盐水法;抗人球蛋白法;凝聚胺法;交叉配血试验 交叉配血试验是输血前一项重要的常规工作,其目的是 检测受血者与供血者抗原抗体是否相容,防止输血反应发 生,确保临床输血安全.由于盐水法具有简便快速的特点, 在交叉配血工作中得到广泛应用.但是盐水法交叉配血试 验只能检出不相配合的完全抗体(天然抗体IgM),而不能检 作者单位:454000河南省焦作市中心血站 出不完全抗体(免疫性抗体IgG),使其安全性受到了极大 限制.为此,我们选用低离子凝聚胺(polybrene)法进行交叉 配血试验,并和盐水法,抗人球蛋白法进行了比较,取得了满 意效果. 1资料与方法 1.1一般资料输血送检血液标本1253例. 1.2试剂抗A,抗B标准血清由长春博德生物技术有限 中国现代药物应用2011年5月第5卷第9期ChinJModDrugApp1.May201l,V01.5.No.9 责任公司提供;A型,B型试剂红细胞由上海血液生物医药 有限责任公司提供;盐水抗D血清由英国劳博公司生产提 供;广谱抗球蛋白试剂由上海血液生物医药有限责任公司提 供.polybrene试剂由台湾东耀企业有限公司提供. 1.3主要仪器KA-2200细胞洗涤离心机(日本KUB. OTA),微量移液器. 1.4血型鉴定按照有关规范要求,对受血者及献血者血 液标本进行ABO血型及Rh血型鉴定.选用与受血者 ABO血型及Rh血型同型的献血者血液进行交叉配血实验. 1.5交叉配血方法 1.5.1凝聚胺配血法交叉配血试验,严格遵守试剂说明书. 注意必须在显微镜下观察结果,以避免弱凝集现象的漏检. 1.5.2盐水法交叉配血试验及抗人球蛋白法(Coombs)交叉 配血试验按有关文献要求进行操作J. 1.6统计学处理数据用百分率进行统计处理. 2结果 1253例凝聚胺法与传统的交叉配血法结果见表1. 表11253例凝聚胺交叉配血法和传统配血法 结果比较(例,%) 1253例交叉配血试验中,盐水法出现凝集阳性结果1 例,凝聚胺法,抗人球蛋白法均为3例.其中1例患者盐水 法,凝聚胺法,抗