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血脂及血浆脂蛋白检验精选
* 按是否继发于全身性疾病分类 继发性高脂血症: 原发性: 继发性者由一些全身性疾病引起血脂异常,如糖尿病、肾病综合征、肾功能衰竭、甲状腺功能减退症、肝胆疾病、系统性红斑狼疮、肥胖症、饮酒等。此外,某些药物如β-受体阻断剂、降压药等也可引起血脂异常。 在排除继发性高脂血症后,可诊断为原发性。已知部分原发性高脂血症由先天性基因缺陷所致 * 高脂血症的基因分型法 表10-5 家族性高脂血症的临床特征 常 用 名 基因缺陷 临床特征 表型分类 家族性高胆固醇血症 L LDL受体缺陷 以胆固醇升高为主,可伴轻度甘油三酯升高,LDL明显增加,可有肌腱黄色瘤,多有冠心病和高脂血症家族史。 Ⅱa Ⅱb 家族性Apo B100缺陷症 ApoB100缺陷 同上 同上 家族性混合型高脂血症 不清楚 胆固醇和甘油三酯均升高,VLDL和LDL都增加,无黄色瘤,家族成员中有不同型高脂蛋白血症,有冠心病家族史。 Ⅱb 家族性异常β脂蛋白血症 ApoE异常 胆固醇和甘油三酯均升高,乳糜微粒和VLDL残粒以及IDL明显增加,可有掌皱黄色瘤,多为Apo E2(2/2)表型。 Ⅲ 家族性高甘油三酯血症 不清楚 以甘油三酯升高为主,可有轻度胆固醇升高,VLDL明显增加。 Ⅳ * (二)低脂蛋白血症 一般将血清TC<3.3mmol/L,或TG<0.45mmol/L,或LDL-C< 2.1mmol/L者,称为低脂蛋白血症。脂质如TC和TG同时降低或脂蛋白 如HDL、LDL和VLDL同时降低多见。 定义: 原因:因某种原因使脂蛋白合成减少,另外分解代谢旺盛也可导致。 分类:原发性和继发性 (三)高脂血症与动脉粥样硬化 致AS的因素 抗AS的因素 * 第二节 血脂、脂蛋白及载脂蛋白测定 目前临床上开展的血脂测定项目包括TC、TG、HDL及其亚类胆固醇、LDL-C、Lp(a)以及部分载脂蛋白如ApoAI、ApoB等。 TC、TG、HDL-C、LDL-C测定是血脂测定的四个基本指标。 血浆4℃冰箱中过夜观察其分层现象及清澈度可初步估计各种脂蛋白的变化状况。 血浆脂蛋白电泳结合TC、TG水平有助于高脂血症分型。 概况: * 血脂测定标准化: 血脂分析前变异来源于: ①生物因素,如年龄、性别、种族等因素的个体差异。 ②生活方式,包括饮食习惯、吸烟、运动及应激等。 ③临床方面包括疾病或药物引起的脂代谢改变。 ④血标本采集与处理方面 准确测定应从分析前的准备开始,包括受试者的准备,标本 采集,合格的试剂、校准物的选用,检测方法选择。 方法学上应该采用美国疾病控制中心(CDC)或中华医学会检验分会推荐的操作方法。 * 一、血清(浆)静置试验 将患者空腹12h后采集静脉血分离出血清置4℃冰箱中过夜,然后观察其分层现象及清澈度。 空腹血清混浊,表示TG升高,可放在4℃冰箱过夜后进一步观察,如果上层出现奶油样且下层清澈,表明CM升高,VLDL正常,可能为I型高脂血症。如果上层出现奶油样且下层混浊,表明CM及VLDL均升高,可能是Ⅲ、V型。再做电泳若出现宽β带即为Ⅲ型高脂血症 空腹血清混浊,4℃冰箱中过夜后仍为均匀混浊,表明VLDL升高,此时应进一步测定TC, TC升高者可能是III或IIb型,而TC正常者则可能为Ⅳ型。IIa型高脂血症血清也清澈透明。 正常空腹血清应清澈透明。 * 二、血清(浆)总胆固醇测定 化学法 酶法 血清中TC包括CE和FC, 其中CE占70%,FC占30%。血清中胆固醇在LDL中最多,其次是HDL * (一)化学测定法 化学测定法通常需抽提、皂化、纯化、显色四个 步骤。显色剂主要有两类: ①醋酸-醋酐-硫酸 (L-B反应) ②高铁硫酸 (Zak反应) 特点: * 1.Liberman-Burchard反应 1885年Liberman发现胆固醇在硫酸、醋酐溶液中显色,1890年Burchard用此反应测定胆固醇称为L-B反应。 1953年Zak提出用硫酸、醋酸和Fe3+等与胆固醇作用生成紫红色化合物来测定胆固醇,称为Zak反应。 2.Zak反应 条件要求严格、试剂腐蚀性强、对FC与CE的显色强度不一致、呈色不稳定 比L-B反应的灵敏度高,,呈色稳定不需要皂化,反应特异性差 3、Abell法(ALBK法):公认的参考方法 皂化(KOH乙醇溶液水解CE成为FC)、抽提(正己烷 或石油醚提取FC)、显色(L-B反应)。 * (二)酶测定法(常规方法) CEH-COD-PAP法 原理: CE+H2O FC+FFA FC+O2 △4-胆甾烯酮+H2O2
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