急性毒性医学课件.pptVIP

经 口 急 性 毒 性 试 验 * * 308，333共取动物数目： 目的 学习急性毒性试验的实验设计原则，学会经口灌胃技术、随机分组方法，掌握主要的LD50计算方法和急性毒性分级标准。 * 要求 1．学习急性毒性试验的实验设计原则，学会经口灌胃技术、随机分组方法。 2．掌握主要的LD50计算方法和急性毒性分级标准。 * 原理 选择健康的实验动物，根据体重按随机分组的方法，依据LD50计算的设计原则将动物分成数个染毒组。一次或24h内多次给予受试物后了解动物所产生的急性毒性反应及其严重程度，中毒死亡的特征以及可能死亡的原因，观察受试物毒性反应与剂量的关系，求出半数致死剂量，并根据LD50值将受试物进行急性毒性分级。 * 内容 1.健康小鼠的选择，性别的辨认 2.称重、编号和随机分组方法 3.受试化学物溶液的配制 4.小鼠经口灌胃操作技术 5.毒性体征的观察、LD50计算和毒性分级 * 步骤 1.健康动物的选择。 2.性别辨认 3.动物称重、编号和分组 4.剂量设置：选用5%CuSO4，分为6个剂量组 * (1) 250.0 mg/kg (2) 330.0 mg/kg (3) 435.2 mg/kg (4) 574.2 mg/kg (5) 757.7 mg/kg (6) 1000.0 mg/kg * 5.灌胃操作：灌胃时将针按在注射器上，吸入药液。左手抓住鼠背部及颈部皮肤将动物固定，右手持注射器，将灌胃针插入动物口中，沿咽后壁徐徐插入食管。针插入时应无阻力，若感到阻力或动物挣扎，应立即停止进针或将针拔出，以免损伤或穿破食管及误入食管。 * 6.中毒体征和动物死亡情况观察：染毒后注意观察毒性体征和死亡情况。高剂量组动物的死亡常很快发生，染毒后应即密切观察。观察和记录中毒体征及出现的时间、死亡数量和时间及死亡前的特征。根据观察情况分析中毒特点和毒作用靶器官。 * 结果评定 根据实验动物中毒体征、死亡时间和特征、LD50，按受试物种类，分别参照相应的经口急性毒性分级标准进行评定，判断该受试物的毒性大小及毒性特征。 * 改进寇氏法：利用剂量对数与死亡率呈S型曲线而设计的方法。本法要求每个染毒剂量组动物数要相同，各剂量组组距呈等比级数，死亡率呈正态分布，最低剂量组死亡率呈＜20%，最高剂量组死亡率＞80% * 组别 （mg/kg） 对数 剂量 动物数 死亡数 死亡率 存活率 p × q (n) （只） (p) (q) 1 2 3 4 5 6 250.0 330.0 435.2 574.2 757.7 1000.0 10 10 10 10 10 10 i=? ∑p=？ CuSO4小鼠经口染毒死亡情况 * 计算公式： m=Xk－ｉ（∑p－0.5） Sm =ｉ ∑ pq n 式中：m：lg LD50 ｉ：相邻两剂量组之对数剂量差值 Xk：最大剂量的对数值 q：存活率（q=1-p） ∑p：各剂量组死亡率总和 n：每组动物数 * 某化学物质小鼠经口染毒死亡情况 组别 剂量 动物数 死亡数 死亡率 存活率 p.q mg/kg 对数 （只） （只） （p） （q） 1 15 1.1761 10 0 0 1 0 2 18 1.2561 10 2 0.2 0.8 0.16 3 21.7 1.3361 10 5 0.5 0.5 0.25 4 26.1 1.4161 10 7 0.7 0.3 0.21 5 31.3 1.4961 10 9 0.9 0.1 0.09 　 　 i=0.08 　 　 Σp=2.3 　 　 举例：LD50的计算——寇氏法 lgLD50 及其95%可信限为1.3521±1.96×0.0213＝1.3521±0.0417 LD50 及其95%可信区间范围为22.50mg/kg(20.44~24.76mg/kg) 举例：LD50的计算——寇氏法 如何计算剂量？ 5% CuSO4：100ml含5g CuSO4 举例：某小鼠体重为20g，第一剂量组250 mg/kg的这只小鼠需注射的剂量是多少？ 1000克体重需250mg受试物，所以20克体重需5mg受试物。因为100ml含5000mg CuSO4 ，那么0.1ml含5mg CuSO4 。所以体重为20g的小鼠需注射0.1ml。以此类推…… * 实习报告 目的 原理 步骤 结果 LD50的计算方法和结果 * 体征： 行为方面：体位异常，叫声异常，活动异常，不安，多动，少动或呆卧，侧倒 运动状态：运动异常，运动失调，步态蹒跚，痉挛，抽搐，强直，麻痹，后肢无力，管状尾 对外界刺激反应性：易兴奋，易激惹，感觉迟钝或过敏，反应低下或过高 瞳孔散大或缩小，肌肉松弛或紧张等。 * *