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对S-腺苷蛋氨酸的相关了解 一、概述 腺苷蛋氨酸，又称腺苷甲硫氨酸。英文名为S-AdenosvlmeIhionine，常用缩略语为SAM，SAMe或AdoMet，是甲硫氨酸的活性形式广泛存在于动物、植物和微生物体内，也是人体内一种重要的生理活性物质，参与了40多种生化反应。在生物体内由蛋氨酸和ATP合成酶(Sadenosylinethionine synthetase)(EC2.5.1.6)催化合成。在此反应中ATP的腺苷转移到蛋氨酸上，形成一个高能硫原子，通过亲核进攻使与其相连的碳原子活化，从而具有转甲基，转氨丙基，转硫基等作用。化合物(如图1.1)SAM是与人体中脂肪、蛋白质、糖类等的代谢有关的重要生理活性物质，作为中间代谢物，广泛存在于各种生物体内，参与诸多的生化反应。在生物体中，SAM通过S-腺苷蛋氨酸合成酶，消耗ATP使蛋氨酸腺苷化合成，ATP经过这外单纯的反应以非随机的方式裂解。 SAM对人体许多疾病的预防和治疗，都有积极作用。SAM可以由化学合成、体外酶促合成或微生物发酵三种途径得到。化学法合成由于产率低，反应底物。高半胱氨酸价格昂贵，反应产物又为SAM的消旋物等明显缺点，已很少使用。体外酶法合成尽管产物纯度高，但成本也高，一般只用于合成同位素标记的SAM。而通过微生物发酵，再从中提取精制SAM是目前其工业化生产的主要途径。 图1.1腺苷甲硫氨酸分子结构图 1.1 腺苷蛋氨酸的性质 腺苷蛋氨酸，又称腺苷甲硫氨酸，分子式C15H22N65S，分子量399。SAM盐为白色结晶或结晶性粉末，易溶于水，微溶于甲醇、乙醇，在乙醚、丁酮中不溶解。S一腺苷蛋氨酸是双手性物质，有2种异构体：(R，S)一SAM和(S，S)一SAM，只有(S，S)一SAM，即(一)一SAM才具有生物活性。其结构及合成如图1.2所示， 图1.2SAM的结构及合成 由其化学结构可以看出，在SAM分子中有四个可解离基团，嘌呤环上的氨基(pKa=3.4)、甲硫氨酸残基上的羧基(pKa==1.8)、氨基(pKa==7.8)和硫基(pKa=12.5)。其中硫基具有很强的极性，带有永久的正电荷。SAM的等电点为7.24。SAM的重要生理功能在很大程度上在于其分子结构中含有一个活性甲基和一个高能硫原子。 1.1.1 腺苷蛋氨酸的稳定性 腺苷蛋氨酸在生产和应用过程中最关键的问题是稳定性差、易发生失活反应。这在很大程度上限制了它在临床上的应用。 首先，SAM分子在常温及生理pH下，由于高能硫离子的存在，使相连的C原子活化，容易受到亲核进攻，硫一碳键极易断裂，会发生各种降解及硫原子上的手性异构反应。除了甲基化反应，SAM分子还可能由于水解而失去腺嘌呤，或者通过各种复杂的途径生成5’-脱氧-5’-(甲硫)腺苷(5’-deoxy-5’-(methylthio)adenosine，MTA)和高丝氨酸(homoserine)，而且还会瞬时的消旋硫原子上的手性。Della Haba等曾指出在SAM的硫原子上有两种构象(R和S型)，只有一种能被生物合成和利用，这种构象由cornforth等确定为： (s,s)型SAM。Stolowitz及Minch使用NMR分析发现从酵母提取的SAM中的20％以(R,S)型SAM存在，也证明了消旋过程的发生。 人们在研究SAM失活机理时发现，由于SAM有多个可解离基团，因此其失活反应受pH值影响很大。水解成腺嘌呤的反应可在pH6时强烈抑制，在pH4.5或更低时完全消除。由于含有离子化的2’(或3’)-OH，与其它不含离子化2’(或3’)-OH的分子如3’-脱氧-SAM相比，SAM以相当低的速度水解，并且糖苷键的断裂非线性依赖于-0H的浓度。裂解反应以相对高的速率持续进行，直到pH降为1.5。由于其羧基的pKa，如其它大多氨基酸一样，处于1.8-2.2之间，因此，该反应不受抑制，直到pH接近或小于2。Hoffman发现，当pH下降至羧基的pKa以下时，裂解常数KH大幅度下降。消旋反应表现出较低的pH依赖性，在pH7.5—1.5范围内，消旋反应速率没有明显变化。在pHl.5时消旋反应是唯一以显著速度发生的失活反应，这样就可以不受其它反应的干扰而进行消旋反应的动力学分析。 另外，温度、湿度对SAM的失活反应也有影响。Hoffman在用S-腺苷高半胱氨酸(AdoHcy)和CH3I化学合成SAM时发现，在16℃、含水量5％的合成体系中，消旋反应比37℃的水溶液中慢。 1.1.2 腺苷蛋氨酸盐的稳定性 SAM硫酸盐和SAMM盐酸盐在干燥、低温条件下，稳定性仍较差，因此只能被用于一般生化研究。目前，临床上使用