抗原－抗体反应（63页）.pptVIP

(二)间接(被动)凝集反应(indirect/passive agglutination) 原理： 可溶性抗原(或抗体)，吸附颗粒载体 ＋ 抗体(或抗原) ? 凝集 间接凝集反应种类及所用载体 间接凝集反应 载体 间接血凝实验 红细胞 间接乳胶凝集实验 聚苯乙烯胶乳颗粒 间接炭凝实验 活性炭 (三)间接凝集抑制试验 (indirect agglu-tination inhibition test) 原理： 抗体 ＋ 反应 ＋ 抗原致敏载体颗粒 可溶性抗原 凝集 (四)协同凝集试验(coagglutination test) 原理： IgG结合于SPA (金黄色葡萄球菌) ＋ 凝集 抗原(可溶性） 应用：检测微量抗原(存在于血液、脑脊液和其他分泌液)。用于流脑、伤寒、布氏菌病等的早期诊断。 (五)抗球蛋白试验(antiglobulin test，Coomb’s test) 原理： 红细胞(Rh+) ＋ 凝集(不可见) ＋ 抗人球蛋 抗Rh抗体(IgG) 白抗体 凝集(可见) 灵敏度：3X10-2ug/ml 二种方法：A.直接抗球蛋白实验 B.间接抗球蛋白实验 三.免疫标记技术 用荧光素、同位素或酶等示踪物质标记抗体(或抗原)，与抗原(或抗体)进行反应，通过检测示踪物质，分析被检抗原(或抗体)的存在或含量的方法。 灵敏度：高，1X10-4 ～1X10-5ug抗体/ml 应用：微量物质的定性、定量或定位。 免疫标记技术的基本类型： （一）免疫荧光技术(immunofluorescence technique) （二）免疫酶技术(immunoenzymatic technique) （三）同位素标记技术(isotope labelling technique) （一）免疫荧光技术(又称荧光抗体技术) 原理：用荧光素(如异硫氰酸荧光素、罗丹明B200等) 标记抗体(荧光抗体)，用荧光抗体浸染细胞或组织切片，抗原与荧光抗体结合，于荧光显微镜下观察荧光，确定被检抗原的存在。 免疫荧光技术包括： 直接法 间接法 间接补体增强法 1．直接法 优点：特异性强 缺点：必须制备针对每一种抗原的荧光抗体。 应用：用于抗原鉴定、定位和分布。 第一节 抗原－抗体反应 抗原与相应抗体在体内或体外相遇可发生特异性结合，呈现的某种反应现象。 抗原抗体反应有以下几个特点: 1.抗原与抗体结合是特异性结合 表位(抗原)——超变区(抗体) 2.抗原抗体结合是分子表面的非共价键结合 氢键、疏水键、静电引力和范德华力(Van der waal‘s force) 、电子云力的合力。 抗原和抗体可解离,性质不变。 3.抗原抗体反应可分为两个阶段 （1）特异性结合阶段  此阶段需时短,仅需几秒到几分钟,无可见 反应出现 （2）可见反应阶段 需时较长,数分,数小时或数日出现可见现 象,表现为沉淀,凝集,细胞溶解等 4.抗原和抗体结合是否呈现明显可见的反应现 象,与两者的分子比例密切相关 抗原抗体反应的主要影响因素： 1.电解质: 在中性或碱性条件下,抗原抗体均带负电荷,适当浓度的电解质会使它们失去一部分负电荷而互相结合,出现明显的沉淀或凝集现象