分子生物学课件 RNA的生物合成.ppt

４．核内tRNA前体的酶促拼接 酵母tRNA前体的拼接需要ATP和一个内切核酸酶。 反应分为两步进行： （1）由一个特殊的核酸内切酶断裂磷酸二酯键，切除插入序列，反应不需要ATP。 （2）由RNA连接酶催化使切开的tRNA两部分共价连接。反应需要ATP（植物、酵母类）。 生物体存在分子间的拼接，即反式拼接。 （二）反式拼接与选择拼接 （trans-splicing and alternative-splicing） 1. 反式拼接（trans-splicing） 如果一个分子具有5’拼接点，另一个分子具有3’拼接点，它们又靠得很近，就可以发生反式拼接（如锥虫的众多mRNA）。 一个基因的转录物在不同的发育阶段，分化细胞和生理状态下，通过不同的拼接方式，可以得到不同的mRNA和翻译产物，称为选择性拼接。所产生的多种蛋白质即为同源体（isoform）。 2.选择拼接（alternative splicing） 现以降钙素的mRNA前体为例，说明选择拼接的机制。 （三） RNA拼接的生物学意义 1.RNA拼接是生物机体的进化历史形成的，是进化的结果。 3.从内含子的拼接方式和分布可以大致推测其起源时间。 2.RNA拼接是基因表达调控的重要环节。 4.拼接促进有益重组，对生物机体进化十分重要。 5.内含子和外显子是相对的，有些内含子可以编码序列，能够产生蛋白质或功能RNA，不能将内含子看成是无用序列，因此，拼接过程是必要的。 四、RNA的编辑（RNA editing） 是mRNA的一种加工方式，它导致了DNA所编码的遗传信息的改变，这种改变mRNA编码序列的方式，叫RNA的编辑。 经过编辑的mRNA序列发生了不同于模板DNA的变化。 （一）定义 mRNA的顺序 GAU UGU AUA * * * * 锥虫线粒体细胞色素氧化酶亚基II（coII）基因：与酵母或人的相应基因对比在一个-1的移码突变，然而酶的功能又是正常的。 DNA正链的顺序 GA G A A 对应的蛋白质序列 Asp Cys Ile Benne等人的工作之后，又有一些试验陆续在多种生物中发现RNA的编辑，其中包括U的插入和删除，C、A和G的插入，C被U取代或U被C取代，A转变为I等方式。 Apo B100（肝中） Apo B48（小肠中） （Mr 512000） （Mr 241000） CAA C 脱氨 U 即Gln 哺乳动物的载脂蛋白B（Apolipoprotein B Apo B） 是同一基因产物 UAA UAA（终止子） 编辑作用是沿着编辑前的mRNA3→5方向进行，RNA编辑所需的遗传信息来自于指导RNA（guide RNA, gRNA），或者来自被编辑RNA自身。 （二）插入U的机制 １．首先，从锥虫线粒体mRNA编辑和其他的例子可以看出，RNA编辑可以消除移码突变的危害。 （三）RNA编辑的生物学意义： ２．RNA编辑还和生物发育与分化有关，是基因调控的一种重要方式。 ３.RNA编辑增加了基因产物的多样性，由同一基因转录物经编辑可以表达出多种同源体蛋白质。 4.RNA编辑还可以使基因产物获得新的结构和功能，有利于生物进化。 ５．RNA编辑还可能与学习和记忆有关。 五、RNA的再编码(recoding) 定义：编码在mRNA上的遗传信息在某种情况下可以用不同的方式译码，即改变了原来编码的含义，称再编码。 校正tRNA:通常是一种变异的tRNA，它们或是反密码子环碱基发生改变，或是决定tRNA特异性即个性的碱基发生改变，从而改变了译码规则，故而使错误的译码信息受到矫正。 六、 RNA生物功能的多样性 1．RNA在遗传信息的翻译中起着决定性的作用（三种RNA）; 2. RNA具有重要的催化功能和其他持家功能； 3．RNA转录后加工和修饰依赖于各类小RNA 和其他蛋白质复合物； 4．RNA对基因表达和细胞功能具有重要的调节作用； 5．RNA在生物进化中起重要的作用。 §4-4 终止子和终止因子 一、基本概念 终止子（terminator） ：模板DNA上存在终止转录的特殊信号 终止因子（termination factor）：协助RNA聚合酶识别终止信号的辅助因子（蛋白质），称为终止因子。 通读（readthrough）：有些终止子的作用可被特异的因子所阻止，使酶得以越过终止子继续转录，称通读。 抗终止因子（antitermination factor）：这种引起抗终止作用的蛋白质称为抗终止因子。 Terminator is a sequence of DNA, represented at th