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第六章 环境生物监测与安全评价.ppt
环境监测的过程一般为: 现场调查 监测计划设计 优化布点 样品采集 运送保存 分析测试 数据处理 综合评价 3.环境监测的连续性 由于环境污染具有时空性等特点,只有坚持长期测定,才能从大量的数据中揭示其变化规律,预测其变化趋势,数据越多,预测的准确性就越高。 4.环境监测的追踪性 环境监测包括监测目的的确定、监测计划的制订、采样、样品运送和保存、实验室测定以及数据整理等过程,是一个复杂而又有联系的系统,任何一步的差错都将影响最终数据的质量。 为保证监测结果具有一定的准确性、可比性、代表性和完整性,需要有一个量值追踪体系予以监督。为此,需要建立环境监测质量保证体系。 最先问世的生物传感器是酶电极。20世纪70年代后,人们开始研究微生物电极、细胞器电极、动植物组织电极以及免疫电极等新型生物传感器,使生物传感器的类型大大增多。 生物传感器应用的是生物机理,与传统的化学传感器和离线分析技术(如HPLC 或质谱)相比有着许多不可比拟的优势, 如选择性高, 灵敏度高, 稳定性较好, 成本低, 能在复杂的体系中进行快速在线连续监测。 在环境保护领域里有着广阔的应用前景。 (2)将热变化转化为电信号 固定化的生物材料与相应的被测物作用时常伴有热的变化,把反应的热效应借热敏电阻转化为阻值的变化,后者通过放大器的电桥输入到记录仪中。 (3)将光效应转化为电信号 有些酶如过氧化氢酶,能催化过氧化氢鲁米诺体系发光。将过氧化氢酶膜固定在光纤或光敏二极管的前端,再和光电流测定装置相连,即可测定过氧化氢的含量。 许多酶反应都伴随过氧化氢的产生,例如葡萄糖氧化酶在催化葡萄糖时产生过氧化氢,如把葡萄糖氧化酶和过氧化氢酶一起做成复合酶膜,则可用上述方法测定葡萄糖。 (4)直接产生电信号方式 这种方式可使酶反应伴随的电子转移、微生物细胞的氧化直接通过电子传递的作用在电极表面上发生。 除上述四种外,随着科学技术的发展,基于新的原理的生物传感器将不断出现,例如正在研究利用细胞受体和自激振荡等作用现象的新型生物传感器。 (2)代谢型或催化型生物传感器 是底物与分子识别元件上的敏感物质相作用并产生产物,信号转化器将底物的消耗和产物的增加作为输出信号,这类传感器称为代谢型或催化型生物传感器。 3.根据生物传感器的信号转化器 可分为: 电化学生物传感器、 半导体生物传感器、 测热型生物传感器、 测光型生物传感器、 测声型生物传感器等 BOD传感器的基本原理 当生物传感器置于恒温缓冲溶液中,在不断搅拌下,溶液被氧饱和,生物膜中的生物处于内源呼吸状态,溶液中的氧通过微生物的扩散作用与内源呼吸耗氧达到一个平衡,传感器输出一个恒定电流。 当加入样品时,微生物由内源呼吸转入外源呼吸,呼吸活性增强,导致扩散到传感器的氧减少,使输出的电流减少,几分钟后,又达到一个新的平衡状态。在一定条件下,传感器输出电流值与 BOD浓度呈线性关系。 DNA核酸杂交生物传感器的理论基础是DNA碱基配对原理。 高度专一性的DNA 杂交反应与高灵敏度的电化学检测器相结合形成的杂交生物传感器,在环境生物技术领域中将大有所为。 DNA杂交生物传感器可用于环境样品的微生物检测,如水体中病原菌的测定的测定。 这类传感器的研究内容包括: 核酸探针固定化的优化, 杂交反应条件, 指示剂的结合与检测等。 DNA生物传感器除用于检测外,还可用于研究污染物与DNA之间的相互作用,用于解释不同污染物的毒性作用机理。 例如,DNA传感器可用于实时研究DNA与化学诱变剂之间反应动力学,在污染物与DNA结合相对强度方面提供有用信息,解释污染物-DNA键合的专一性,或探讨DNA结构变化 DNA生物传感器应用于环境污染监测有着广阔的前景。 目前,核酸识别分子层的研究与利用还处于初期阶段。 DNA生物传感器为生物传感器家族中添加了新的成员,DNA传感器的实现需要正确地选择核酸探针并将其固定化,以及DNA识别信号的有效转换及检测。 毫无疑问,随着该项技术的不断深入研究和日臻成熟,DNA 生物传感器将成为环境污染监测领域中的一个重要手段。 第三节 PCR 技术 PCR技术能快速、特异地在体外扩增所希望的目的基因或DNA片段,是基因扩增技术的一次重大革新,它可以将极微量的DNA特异地扩增上百万倍. 20世纪70年代,Kleppe等人就提出了PCR的工作原理,由于当时的基因工程还处于摇篮时期,这项工作遭到冷遇。
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