人教版选修1专题2课题1微生物的实验室培养（共120张PPT）.ppt

朊病毒（蛋白质） 培养基的配制原则 ①目的要明确：根据培养的微生物种类、培养的目的等确定培养基的类型和配制量。 ②营养要协调：培养基中各种营养物质的浓度和比例要适宜。例如：碳氮比4∶1时，谷氨酸棒状杆菌大量繁殖而产生谷氨酸少；碳氮比为3∶1时，菌体繁殖受抑制而谷氨酸合成量大增。 ③pH要适宜：细菌培养基pH中性或偏碱性，霉菌培养基呈酸性。 无菌操作内容 对实验操作的空间操作者的衣着和手，进行清洁和消毒。 将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌。 为避免周围环境中的微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行。 实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。 实验原理 高压蒸汽灭菌 是将待灭菌的物品放在一个密闭的加压灭菌锅内，通过加热，使灭菌锅隔套间的水沸腾而产生蒸气,从而使温度高于100℃。导致菌体蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的。 实验原理 是利用高温使微生物细胞内的蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的。细胞内的蛋白质凝固性与其本身的含水量有关，在菌体受热时，当环境和细胞内含水量越大，则蛋白质凝固就越快，反之含水量越小，凝固缓慢。 紫外线灭菌 是用紫外线灯进行杀菌。紫外线杀菌机制主要是它诱导了胸腺嘧啶二聚体的形成和DNA链的交联，从而抑制了DNA的复制。波长为200-300nm的紫外线都有杀菌能力，其中以260nm的杀菌力最强。 实验操作 （一） 制备牛肉膏蛋白胨固体培养基 1、计算：根据牛肉膏蛋白胨培养基配方的比例，计算配制100m L的培养基时，各种成分的用量。 3.溶化 将称好的牛肉膏连同称量纸一起放入烧杯，加入少量的水，加热。当牛肉膏溶化并与称量纸分离后，用玻棒取出称量纸。往烧杯中加入称量好的蛋白胨和氯化钠，用玻棒搅拌，使其溶解。加入琼脂，加热使其熔化。在此过程中，不断搅拌，防止琼脂糊底而导致烧杯破裂。当琼脂完全熔化后，补加自来水100 mL。 4、灭菌 将配制好的培养基转移到锥形瓶中，加棉塞，包上牛皮纸，并用皮筋勒紧，再放入高压灭菌锅，在压力为100 kPa、温度为121℃条件下，灭菌15—30 min。将培养皿用几层旧报纸抱紧，5—8 套培养基作一包，包好后放入干热灭菌箱内，在160—170 ℃下灭菌2 h。 三、基本操作程序 3、微生物的恒温培养 3、微生物的恒温培养 1、未接种的培养基表面是否有菌落生长？如果有菌落生长，说明了什么？ （对照组）没有。若有菌落，说明灭菌不彻底。 2、在接种大肠杆菌的培养基上，你是否观察到了独立的菌落？这些菌落的颜色、形状和大小相似吗？ 是。相似。如在肉汤培养基上，大肠杆菌菌落呈白色，为圆形，光滑有光泽，边缘整齐。 3、培养12 h和24 h后，观察到的实验结果相同吗？如果不同，请分析产生差异的原因。 菌落的大小不同，菌落分布位置相同。原因是时间越长，菌落中细菌繁殖越多，菌落体积越大。 4、如果你在培养基上观察到了不同形态的菌落，你能分析出可能是由哪些原因引起的吗？ 说明有杂菌污染。可能原因：灭菌不彻底、接种过程或培养过程中有杂菌污染。 4、菌种的保存 1、下列细菌中，能利用含碳无机物作碳源的是( ) A 光合细菌 B 根瘤菌 C 硝化细菌 D 乳酸菌 2、培养大肠杆菌的培养基中，必需含有的碳源和氮源是( ) A 糖、有机酸等 B 二氧化碳、碳酸盐 C 蛋白质 D 无机氮化物 3、下列叙述不正确的是( ) A 培养基是为微生物的生长繁殖提供营养的基质 B 液体培养基和固体培养基所含的最基本物质不相同 C 微生物在固体培养基上生长时，可以形成肉眼可见的单个细菌 4.获得纯净培养物的关键是（ ） A 将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌 B 接种纯种细菌 C 适宜环境条件下培养 D 防止外来杂菌的入侵 5.下列操作与无菌技术无关的是( ) A 接种前用肥皂洗双手,再用酒精擦拭双手 B 接种前用火焰烧灼接种针 C 培养在50℃左右时搁置斜面 D 在酒精灯的火焰旁完成 9.　产生标准菌落的细菌的最初数目和培养基分别是(　　) A．一个细菌，液体培养基 B．许多细菌，液体培养基 C．一个细菌，固体培养基 D．许多细菌，固体培养基 解析：菌落是一个或几个细菌的子细胞群体，在固体培养基上肉眼可见，是作为菌种鉴定的重要依据，若是多种细菌形成的菌落则不是标准菌落。 答案：C 评析： 本题考查菌落的形成和特点，以及在计数中的应用。 10.消毒和灭菌是两个不同的概念，灭菌是指彻底杀灭微生物使其永远丧失生长繁殖的能力。消毒仅指杀死一部分对人体有害的病原菌而对被消毒的物体基本无害。下列哪些事物适用于消