大岩桐soc1同源基因的克隆和表达的初步分析-遗传学专业论文.pdf.docxVIP

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2018-05-05 发布于上海
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大岩桐soc1同源基因的克隆和表达的初步分析-遗传学专业论文.pdf

and1.4kblongweregot.Theresultshowthatweconstructedtheoverexpressvectorsuccessful.4.Inordertoscreentheoptimalregeneratingmedium,theleaveswhichwascultureinvitrowasscoring.Thenitculture inMSmediumwithdifferenthormonesmatching.theresults indicated thatMS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/Lmediumwasthebestoption.Inordertoscreentheoptimalkanamycinresistivity.TheleavesiscultureinMSwithsixantibioticconcentration.Theresults indicatedthatkanamycinresistivityoftheleaveswasunder50mg/L.WeareseekingthemostfeasibletransofrmationconditionsfortobaccobySOC1whichhadgotbefore.Key word:Sinningia specios Benth;Tobacco;SOC1;clone;constructed vector;screen目录1综述引言………………………………………………………………………………………………1 1.1重瓣大岩桐概述1.1.1重瓣大岩桐的形态学特征……………………………………………………………21.1.2重瓣大岩桐的生活习性………………………………………………………………21.1.3大岩桐组织培养研究进展……………………………………………………………21.1.4大岩桐分子生物学研究进展…………………………………………………………21.2高等植物成花诱导1.2.1 光周期途径……………………………………………………………………………31.2.2 春化途径………………………………………………………………………………41.2.3 自主调节途径…………………………………………………………………………51.2.4 赤霉素途径……………………………………………………………………………51.2.5 开花途径整合子………………………………………………………………………81.3 MADS-box基因研究进展1.3.1MADS-box基因的类型…………………………………………………………………81.3.2植物MADS-box基因的结构……………………………………………………………91.4 SOC1/TM3类MADS盒亚家族基因研究概况1.4.1SOC1/TM3基因的发现……………………………………………………………… 101.4.2SOC1/TM3类亚家族基因的表达和功能研究……………………………………… 121.5 同源克隆技术…………………………………………………………………………… 132大岩桐SOC1同源基因的克隆及特征分析2.1 材料和试剂2.1.1 植物材料、菌种和载体……………………………………………………………152.1.2 酶和生化试剂………………………………………………………………………152.1.3 主要仪器……………………………………………………………………………152.1.4 主要试剂配制………………………………………………………………………152.1.5 实验中所用程序及软件……………………………………………………………162.2 实验方法2.2.1 总RNA的提取(异硫氰酸胍法) …………………………………………………… 162.2.2甲醛变性凝胶RNA电泳……………………………………………………………162.2.3转录生成cDNA第一链……………………………………………………………… 172.2.4SOC1中间部分编码序列的克隆……………………………………………………172.2.5DNA凝胶回收…………………………………………………………………………182.2.6T载体的连接…………………………………………………………………………182.2.7 大肠杆菌感受态的制备及转化……………………………………………………192.2.8 连接产物转化大肠杆菌……………………………………………………………192.2.9 挑单斑培养…………………………………………………………………………192.2.10质粒DNA的提取…………………………………………………………………… 202.2.11PCR鉴定…………