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大针茅质膜水通道蛋白基因(sgpips)全长cdna序列的克隆及序列研究-生物化学与分子生物学专业论文.pdf
目录1引言................................................................11.1大针茅植物简介..................................................11.1.1大针茅植物特征................................................11.1.2大针茅植物的研究概况..........................................11.2水通道蛋白简介..................................................21.2.1水通道蛋白分类................................................21.2.2水通道蛋白的结构及透水机制....................................31.2.3水通道蛋白在植物中的功能......................................41.3大针茅及其水分利用..............................................51.4立题依据和意义..................................................62材料与方法..........................................................62.1实验材料........................................................62.2仪器和试剂......................................................62.3总RNA提取和纯化72.4引物的设计及合成................................................72.4.1SgPIPs中间片段cDNA序列扩增引物72.4.2RACE引物的设计及合成8SgPIP1-1全长cDNA序列扩增引物9SgPIP1-2和SgPIP1-3全长cDNA序列扩增引物9SgPIPs中间片段的克隆9RT-PCR反应9RT-PCR产物回收102.5.3目的片段的克隆...............................................112.5.4菌种的保存及目的片段的序列测定...............................12RACE法克隆SgPIPs末端序列12SgPIPs全长cDNA序列克隆182.8序列分析方法....................................................183结果与分析.........................................................183.1总RNA的检测结果183.2SgPIPs中间片段cDNA序列的克隆、测序及序列分析203.2.1SgPIPs中间片段cDNA序列的克隆203.2.2SgPIPs中间片段cDNA序列的阳性克隆鉴定及序列分析223.3SgPIPs的RACE产物克隆、测序及序列分析253.3.1SgPIPs的3′RACE产物克隆、测序及序列分析253.3.2SgPIPs的5′RACE产物克隆、测序及序列分析303.4SgPIPs的全长cDNA序列克隆、测序及序列分析323.4.1SgPIP1-1的全长cDNA序列克隆、测序及序列分析323.4.2SgPIP1-2和SgPIP1-3的全长cDNA序列克隆、测序及序列分析353.5SgPIPs基因的氨基酸及进化分析423.6SgPIP1-1蛋白质结构预测444讨论...............................................................444.1大针茅SgPIPs中间片段和末端cDNA序列克隆444.1.1大针茅SgPIPs中间片段序列克隆44大针茅SgPIPs末端cDNA序列克隆45大针茅SgPIPs全长cDNA序列克隆454.2大针茅SgPIPs基因的序列特征464.3SgPIP1-1,SgPIP1-2,SgPIP1-3的进化分析465结论...............................................................47致谢..............................................................48参考文献.................
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