胆囊粘膜abcg1基因表达和胆囊胆固醇息肉发病关系的研究-外科学(普外)专业论文.pdf.docxVIP

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2018-05-05 发布于上海
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胆囊粘膜abcg1基因表达和胆囊胆固醇息肉发病关系的研究-外科学(普外)专业论文.pdf.docx

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胆囊粘膜abcg1基因表达和胆囊胆固醇息肉发病关系的研究-外科学(普外)专业论文.pdf

5）全自动组织脱水浸蜡机（日本TepSakura公司）6）石蜡切片机（德国Leitz公司）7）倒置显微镜（日本Olympus公司）8）PCR热循环仪（TTC-225）（美国MJ Research公司）9）凝胶图像分析仪Fluor-STM Multimanger（美国Bio-Rad公司）10）超净工作台（香港Heal Force公司）11）Allera-21R型低温高速离心机（美国Beckman公司）12）电热恒温水浴箱（上海医疗器械七厂）13）超低温冰箱（-86℃ULTFreezer）（美国ThermoForma公司）14）电动匀降机（马来西亚IKAWorks（Asia）Sdn.Bhd）15)电子天平（AL104）（上海MettlerToledo仪器有限公司）16）DNAEngine Opticon2（美国MJ Research 公司）17）PCR96孔板（美国millipore公司）18）恒温磁力搅拌器（上海医疗器械七厂）19）B超仪20）酶标仪2.主要试剂1）一抗：ABCG1（兔抗人，美国Santa Cruz公司）2）二抗：羊抗兔IgG（RP，美国SantaCruz公司）羊抗兔IgG（HRP，美国SantaCruz公司）3）总胆固醇试剂盒、甘油三酯冻干试剂盒（上海科华-东菱诊断用品有限公司）4）游离胆固醇试剂盒（北京五洲元业科贸有限公司）5）磷脂测定试剂盒（酶显色法，北京金豪制药有限公司）6）总胆汁酸测定试剂盒（RANDOX公司）7)Trizolregent(美国Invitrogen公司) 8）OmniscriptRTkit(美国Qiagen公司)RansinRibonucleaseInhibitor(美国Promega公司)RandomHexamerPrimer(美国Promega公司) 11）dNTP12）10×Buffer13)SYBR GreenIMasterMix(美国ABIBiosystem公司) 14)6×上样缓冲液（美国Promega公司)15）DEPC（美国Sigma 公司)16）磷酸盐缓冲液（0.01M PBS，PH7.4）（自配）①储存液：A液：NaH2PO4.2H2O6.24g，去离子水定容至200mlB液：Na2HPO4.12H2071.628g去离子水定容至1000ml②工作液A液9.5mlB液40.5mlNaCL0.85g去离子水定容至1000ml17）柠檬酸盐缓冲液（0.05M，PH6.0）（自配）①储存液：柠檬酸（C6H8O7.H2O）21.01g，去离子水定容至1000ml柠檬酸钠（C6H5O7Na3.2H2O）29.41g，去离子水定容至1000ml②工作液：柠檬酸溶液9.5ml柠檬酸钠溶液41.5ml去离子水定容至1000ml18）β巯基乙醇（β-ME）19）溴酚蓝20）BCAKit21）考马斯亮蓝22）NO-ReducingLaneMaker SampleBuffer23)SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS）①10%分离胶配方（总：5ml）30%聚丙烯酰胺1.67ml去离子水2.02mlTris-HCL（PH8.8）1.25ml10%SDS25μL10%APS30μLTEMED6μL②10%积层胶（总：1.95ml）30%聚丙烯酰胺0.266ml去离子水1.435mlTris-HCL（PH6.8）0.25ml10%SDS10μL10%APS10μLTEMED2μL③6%分离胶配方（总：5ml）30%聚丙烯酰胺1.0ml去离子水2.6mlTris-HCL（PH8.8）1.3ml10%SDS50μL10%APS50μLTEMED4μL④5%积层胶（总：2.0ml）30%聚丙烯酰胺0.33ml去离子水1.4mlTris-HCL（PH6.8）0.25ml10%SDS20μL10%APS20μLTEMED2μL24）RunningBuffer配方①10×RunningBuffer配方Trisbase30.3gGlycine144gSDS10g去离子水定容至1000ml②1×RunningBuffer配方10×RunningBuffer100ml去离子水定容至1000ml25）Blotting Buffer配方①10×BlottingBuffer配方Trisbase30.3gGlycine144g去离子水定容至1000ml②1×BlottingBuffer配方10×BlottingBuffer100ml10%SDS5ml甲醇200ml去离子水，定容至1000ml26）TBS（PH7.4）配方①10×TBS（PH7.4）配方Trisbase30gNaCL80gKCL2g去离子水定容至1000ml②1×TBS（PH7.4）配方10×TBS100ml去离子水定容至1000ml27）1×TBST配方1